生孢梭菌（生孢梭状芽孢杆菌）染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

生孢梭菌（生孢梭状芽孢杆菌）染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒专为生孢梭菌（Clostridium sporogenes）的快速、高灵敏度检测设计，采用染料法荧光定量PCR技术，适用于科研用途。试剂盒基于生孢梭菌保守序列设计特异性引物，确保检测的高特异性和准确性，灵敏度可达几百拷贝/反应。

产品特点

即开即用：用户仅需提供DNA模板，操作简便。

高特异性：引物针对生孢梭菌保守区设计，避免与其他微生物交叉反应。

高灵敏度：检测限低至数百拷贝/反应，适用于低浓度样本。

闭管操作：一管式反应体系，减少气溶胶污染风险。

兼容性强：可与常见核酸提取试剂盒配合使用。

规格参数

包装规格：50次/盒（20μL反应体系）。

保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月；运输需低温。

适用机型：需自备10×ROX校正染料（根据机型选择）。

试剂盒组成

2×qPCR Magic Mix：500 μL（预混含染料、dNTPs、聚合酶等）。

荧光PCR专用模板稀释液：1 mL（用于标准曲线制备）。

qPCR引物混合液：100 μL（生孢梭菌特异性引物）。

实验步骤

1. DNA提取

使用兼容的核酸提取试剂盒制备样本DNA，建议浓度≥10 ng/μL。

2. 标准曲线制备（定量检测需选做）

将阳性对照（1×10^8拷贝/μL）按10倍梯度稀释至1×10^2拷贝/μL，共6个浓度点。

每个浓度点设3个复孔，用于绘制标准曲线（Ct值-log浓度）。

3. PCR反应体系

每20 μL反应体系包含：

10 μL 2×qPCR Magic Mix

2 μL引物混合液

2 μL DNA模板

6 μL无核酸酶水

4. 扩增程序

| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |

| 预变性 | 95℃ | 3 min | 1 |

| 变性 | 95℃ | 15 sec | 40 |

| 退火/延伸 | 60℃ | 45 sec |

5. 数据分析

定性检测：Ct值≤35且扩增曲线呈S型判为阳性。

定量检测：根据标准曲线计算样本拷贝数。

注意事项

本产品仅限科研使用，不可用于临床诊断。

操作分区建议：样本制备区、扩增区、分析区严格分离。

避免反复冻融试剂，使用前需充分离心混匀。

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