耳念珠菌染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

耳念珠菌染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品用途

科研用途，适用于耳念珠菌（Candida auris）的定性及定量检测，检测下限为1.0 ng/μL。

技术原理

基于荧光定量PCR技术，通过特异性引物和荧光染料对靶标DNA进行扩增与实时检测，结合标准曲线实现定量分析。

试剂盒组成

预混反应液：含Taq DNA聚合酶、dNTPs、Mg²⁺缓冲液及荧光染料。

阳性对照：无传染性DNA片段（1×10⁸拷贝/μL）。

模板稀释液：用于标准品梯度稀释。

阴性对照：无DNA模板的缓冲液。

实验步骤

标准曲线制备（以10²~10⁷拷贝/μL为例）

标记离心管：编号7至2，分别对应10⁷~10²拷贝/μL梯度。

稀释阳性对照：

7号管：加入45 μL稀释液 + 5 μL阳性对照（1×10⁸拷贝/μL），震荡混匀，得10⁷拷贝/μL。

依次梯度稀释至2号管（10²拷贝/μL），每步更换枪头。

保存：稀释后标准品置于冰上备用。

PCR反应体系配制

每20 μL反应体系：

预混液10 μL

引物探针混合液2 μL

模板DNA 2 μL

ddH₂O补至20 μL。

上机检测

设置PCR程序：

预变性：95℃ 5分钟

循环阶段（40次）：95℃ 15秒 → 60℃ 1分钟（采集荧光信号）。

数据分析：根据标准曲线计算样品中耳念珠菌DNA浓度。

注意事项

防污染：操作需在独立洁净区域进行，使用带滤芯枪头。

标准品处理：避免反复冻融，稀释后尽快使用。

适用范围：仅限科研，不可用于临床诊断。

性能参数

灵敏度：检测下限0.1%（混合样品）或1.0 ng/μL（纯DNA）。

线性范围：10²~10⁷拷贝/μL（R²≥0.99）。

特异性：不与常见病原体DNA发生交叉反应。

公司正在出售的产品