脑膜炎奈瑟菌Y群染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

脑膜炎奈瑟菌Y群染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

检测原理

基于荧光定量PCR技术，通过特异性引物扩增脑膜炎奈瑟菌Y群保守基因区域（如ctrA或sodC基因），结合嵌入型荧光染料（如SYBR Green I）实时监测扩增产物。荧光信号强度与DNA含量成正比，通过Ct值判定样本中目标DNA的存在。

试剂盒组成

PCR反应预混液：含缓冲液、dNTPs、Mg²⁺、热启动Taq DNA聚合酶及荧光染料。

特异性引物：针对脑膜炎奈瑟菌Y群设计的引物对。

阳性对照：含脑膜炎奈瑟菌Y群DNA，用于实验有效性验证。

阴性对照：无菌水或无模板对照（NTC），排除污染干扰。

核酸提取试剂（可选）：用于临床样本（脑脊液、血液等）的DNA提取。

操作步骤

样本处理：

采集脑脊液、咽拭子等样本，严格无菌操作。

使用配套核酸提取试剂或自动化提取仪提取DNA。

PCR反应体系配制：

按20μL体系混合预混液、引物、模板DNA及对照品。

扩增程序：

预变性：95℃ 5分钟；

循环阶段（40 cycles）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（荧光采集）；

熔解曲线分析（可选）：验证扩增特异性。

结果分析：

阳性样本：Ct值≤设定阈值，且熔解曲线峰值单一；

阴性样本：无Ct值或Ct值＞阈值。

性能特点

高特异性：引物经优化设计，不与相近微生物DNA交叉反应。

便捷性：预混液含上样染料，PCR产物可直接电泳。

质控完善：提供阴阳性对照，确保结果可靠性。

注意事项

本试剂盒仅用于科研，不可用于临床诊断。

避免反复冻融试剂，解冻后需充分混匀。

实验需在符合生物安全标准的实验室进行。

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