山羊附红细胞体（山羊嗜血支原体）染料法荧光定量PCR试剂盒

产品概述

本试剂盒基于染料法荧光定量PCR技术开发，专用于检测山羊附红细胞体（Eperythrozoon lirei，山羊嗜血支原体）的核酸。适用于科研实验，具备高灵敏度和特异性，操作便捷，可满足定性检测需求。

产品特点

即开即用：用户仅需提供待测DNA模板。

高特异性：引物针对病原体高度保守区设计，避免与其他微生物DNA交叉反应。

内控对照：提供阳性对照（无传染性DNA片段），辅助区分假阴性结果。

兼容性：含上样染料，PCR产物可直接电泳分析。

规格：50次/盒（20μL反应体系），适用于常规样本检测。

适用范围：仅限科研用途，不可用于临床诊断或定量分析。

保存与运输

保存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。

有效期：12个月（详见包装标签）。

操作步骤

标准曲线制备（可选）

标记6支离心管（编号7至2），每管加入45 μL荧光PCR专用稀释液。

依次梯度稀释阳性对照（初始浓度1×10^8拷贝/μL），获得10^2~10^7拷贝/μL的6个浓度标准品。

稀释需在独立区域操作，避免污染。

PCR反应体系配制

按待测样本数（N）准备N+2个反应管（含阴性对照及阳性对照）。

每管加入预混PCR试剂（含染料）及模板DNA（2 μL）。

扩增程序

按以下参数设置PCR仪：

预变性：95℃ 5分钟

循环：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（40循环）

反应结束后分析熔解曲线或直接电泳。

注意事项

实验分区操作（样本制备区、试剂配制区、扩增区），避免交叉污染。

使用带滤芯枪头，标准品稀释需严格更换枪头。

阳性对照为DNA片段，无生物传染风险。

质量控制

阴性对照：应无扩增信号。

阳性对照：需出现预期Ct值及熔解峰。

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