犬腺体病毒1型（犬传染性肝炎病毒）染料法荧光定量PCR试剂盒

性能特点

高特异性：针对CAV-1基因组保守区域设计引物及探针，避免交叉反应。

高灵敏度：最低检测限可达5拷贝/反应，优于常规PCR。

闭管操作：一管式预混液设计，减少气溶胶污染风险。

内参质控：部分试剂盒含GAPDH内标基因，防止假阴性。

便捷性：即开即用，部分产品采用冻干微球技术，支持常温运输。

试剂盒组分

主反应混合液：2×qPCR预混液（含染料）、引物探针混合液。

对照品：阳性对照（1×10^8拷贝/μL）、阴性对照。

辅助试剂：模板稀释液、使用手册。

自备材料：DNA模板、超纯水、ROX校正染料（依机型需求）。

样本要求

适用样本：粪便、鼻咽拭子、血液或组织提取的DNA。

样本处理：需确保DNA纯度（A260/A280≈1.8-2.0），避免抑制剂残留。

操作步骤

阳性对照稀释：按10倍梯度稀释（10^2-10^7拷贝/μL），独立操作以防污染。

反应体系配制：

每20μL反应体系含：预混液10μL、引物探针混合液2μL、模板DNA 2μL。

PCR程序设置：

预变性：95℃ 5分钟；

扩增循环：95℃ 15秒 → 60℃ 1分钟（40循环，荧光采集）。

结果判读

阈值设定：以基线荧光信号3-15循环的均值加10倍标准差为阈值。

阳性判定：Ct值≤35且扩增曲线呈S型。

运输与保存

运输条件：低温（-20℃）或常温（冻干微球型）。

保存期限：-20℃避光保存，有效期12个月。

注意事项

分区操作（试剂配制、样本处理、扩增区分离），避免交叉污染。

阳性对照需单独存放，废弃处理需符合生物安全规范。

临床样本需结合其他检测方法综合判断。

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