犬流感病毒通用染料法荧光定量PCR试剂盒

性能特点

即开即用：预混引物、酶及缓冲液，用户仅需提供DNA/RNA模板。

高特异性：针对犬流感病毒保守基因区域设计引物，避免交叉反应。

高灵敏度：荧光定量检测技术，灵敏度达1000拷贝/反应，较常规PCR提升10-100倍。

闭管操作：一管式反应体系，减少气溶胶污染风险。

兼容性：支持常见荧光定量PCR仪（需自备ROX校正染料，依机型而定）。

试剂盒组成

| 成分 | 规格/包装 | 备注 |

| 2×qPCR Magic Mix | 500 μL（棕色管） | 含染料、dNTPs及热启动酶 |

| 荧光PCR模板稀释液 | 1 mL（黄盖） | 用于阳性对照稀释 |

| qPCR引物混合液 | 100 μL（白盖） | 特异性引物及探针 |

| 阳性对照（1×10^8拷贝/μL） | 50 μL（黄盖） | 非活体DNA片段 |

| 阴性对照 | 50 μL（透明管） | 无核酸酶水 |

| 说明书 | 1份 | 含操作流程及数据分析方法 |

运输与保存

运输条件：低温干冰运输。

保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月。避免反复冻融。

操作步骤

1. 样本准备

提取待测样本RNA/DNA，确保无降解（建议使用商业提取试剂盒）。

2. 阳性对照稀释（梯度制备）

按10倍梯度稀释阳性对照（10^2~10^7拷贝/μL），独立操作以避免污染。

3. PCR反应体系配制

| 组分 | 体积（20μL体系） |

| 2×qPCR Magic Mix | 10 μL |

| 引物混合液 | 2 μL |

| 模板DNA/RNA | 2 μL |

| 无核酸酶水 | 6 μL |

4. 扩增程序

| 步骤 | 温度/时间 | 循环数 |

| 逆转录（RT）| 50℃/10 min | 1 |

| 预变性 | 95℃/3 min | 1 |

| 扩增 | 95℃/15 sec → 60℃/1 min | 40 |

| 荧光采集 | 60℃阶段 | 每循环 |

注意事项

实验分区操作，避免交叉污染。

阳性对照需单独存放，使用后彻底清洁工作台。

不同批号试剂不可混用。

结果判读需结合标准曲线（Ct值≤35为阳性）。

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