猫疱疹病毒染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

检验原理

采用TaqMan探针法实时荧光PCR技术，通过特异性引物和探针靶向扩增猫疱疹病毒（FHV）的核酸序列，实现对临床样本的病原学检测。

试剂盒组成

| 组分 | 25T/盒规格 | 50T/盒规格 |

| 反应液 | 500μL×1管 | 500μL×2管 |

| 酶液 | 25μL×1管 | 50μL×1管 |

| 阳性质控品 | 250μL×1管 | 250μL×1管 |

| 阴性质控品 | 250μL×1管 | 250μL×1管 |

注意：不同批号组分不可混用。

样本处理与检测步骤

核酸提取（样本处理区）

使用磁珠法或离心柱法提取核酸，建议采用配套核酸提取试剂。

试剂配制（试剂准备区）

反应体系（20μL/管）：

反应液：19μL

酶液：1μL

分装后加入5μL待测核酸或质控品（阳性/阴性对照）。

PCR扩增

按仪器说明书设置程序，推荐反应条件：

预变性：95℃ 5分钟

扩增循环（40次）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）

质量控制

阳性质控品：应出现典型扩增曲线，Ct值≤35。

阴性质控品：无扩增曲线（Ct值≥40或无信号）。

样本判定：Ct值≤38且曲线呈S型判为阳性；Ct值＞38需重复检测。

注意事项

实验分区操作（样本处理、试剂配制、扩增区），避免交叉污染。

阳性对照含非感染性DNA片段，无需生物安全防护。

若使用其他荧光染料（如EvaGreen），需优化引物浓度（0.3–2.4 μmol/L）及反应温度（60–65℃）。

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