猫疱疹病毒1型染料法荧光定量PCR试剂盒

产品概述

本试剂盒采用染料法荧光定量PCR技术，专用于猫疱疹病毒1型（FHV-1）的快速、高灵敏度检测，适用于科研领域。试剂盒包含优化的引物、阳性对照及反应体系，支持定性和定量分析，线性范围达5个数量级，特异性强，可避免与其他病毒核酸交叉反应。

适用仪器：ABI、Bio-Rad、Roche LightCycler等主流荧光定量PCR仪。

检测原理

通过特异性引物扩增猫疱疹病毒1型保守基因序列，结合荧光染料（如SYBR Green）实时监测扩增产物，定量分析病毒载量或定性判断感染状态。

操作步骤

标准曲线制备

标记离心管（7-2号），依次加入45 μL模板稀释液。

梯度稀释阳性对照（初始浓度1×10⁸拷贝/μL），依次获得1×10⁷至1×10²拷贝/μL的标准品，冰上保存。

样品DNA制备

使用兼容的核酸纯化方法提取待测样本DNA，并设置阴/阳性对照。

qPCR反应（20μL体系）

按比例混合PCR反应液、DNA模板及对照。

上机程序：

预变性：95℃ 5分钟；

扩增：95℃ 15秒 → 60℃ 1分钟（40循环）。

结果分析

定量：根据标准曲线计算病毒拷贝数。

定性：Ct值≤35判定为阳性。

注意事项

实验需在无菌环境下操作，避免污染。

试剂解冻后需充分混匀，分装使用以减少冻融次数。

阳性对照仅限实验质控，不可用于临床诊断。

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