塞内卡病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒

塞内卡病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒

商品属性

预期用途

本试剂盒基于染料法荧光定量RT-PCR技术，用于特异性检测塞内卡病毒（SVA/SVV）的RNA。该病毒为单股正链RNA病毒，主要感染猪群，临床表现为蹄部及口鼻水疱、新生仔猪腹泻及神经症状，死亡率可达15%~30%。本产品适用于兽医诊断、疫情监测及科研实验。

检验原理

RNA提取：通过离心柱硅基质膜法从样本中提取病毒RNA。

反转录（RT）：以RNA为模板，利用反转录酶合成互补cDNA。

荧光定量PCR扩增：

采用优化引物及探针（染料法），通过高温变性、退火、延伸循环（35次），特异性扩增目标片段。

荧光信号与扩增产物量成正比，通过标准曲线定量病毒RNA载量。

产品特点

高灵敏度：引物经优化设计，可检测低拷贝数病毒RNA。

便捷性：即开即用，用户仅需提供RNA模板。

质控保障：含阳性对照，避免假阴性结果。

特异性强：针对SVA/SVV基因组保守区域设计，避免交叉反应。

操作流程（简要）

样本处理：采集组织或血清样本，按规范提取RNA。

反应体系配制：将试剂盒组分（酶、引物、缓冲液等）与模板RNA混合。

上机检测：按以下程序运行荧光定量PCR仪：

反转录：50℃ 15分钟

预变性：95℃ 2分钟

扩增循环：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（重复35次）

结果分析：根据阈值循环数（Ct值）及标准曲线判定样本病毒载量。

注意事项

实验需在无菌环境下操作，避免RNA降解。

试剂解冻后需充分混匀，避免反复冻融。

阳性对照需与待测样本分区域操作，防止污染。

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