黑麦草腥黑粉菌染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

黑麦草腥黑粉菌染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒专用于检测黑麦草腥黑粉菌（Tilleiia walkeri Castl.）的DNA，采用染料法荧光定量PCR技术，适用于科研领域的定性及定量分析。试剂盒包含优化的引物、荧光染料、反应缓冲液及阳性对照，确保高灵敏度和特异性。

产品特点

即开即用：用户仅需提供纯化的DNA模板。

高灵敏度：引物及染料针对目标基因保守区域设计，检测限低至单拷贝级别。

特异性强：引物通过生物信息学验证，避免与其他微生物DNA交叉反应。

双重功能：支持绝对定量（标准曲线法）和相对定量，线性范围覆盖5个数量级。

质控完善：含阳性对照，有效排除假阴性干扰。

兼容性广：适配多数商业核酸提取试剂盒。

规格与储存

规格：50次反应（20μL体系/次）。

储存条件：-20℃避光保存，有效期12个月；避免反复冻融。

实验流程

1. DNA提取（样本制备区）

使用自选方法或兼容试剂盒提取样本DNA，建议浓度≥10 ng/μL，A260/A280比值1.8-2.0。

2. 标准曲线制备（独立操作区）

标记6管为梯度稀释点（如7-2），每管加45 μL DEPC水。

取5 μL阳性对照依次稀释，混匀后作为标准品（避免污染）。

3. PCR反应体系配制（试剂配制区）

按以下比例配制（示例）：

| 组分 | 体积（μL） |

| 2× Master Mix | 10 |

| 引物混合液 | 2 |

| DNA模板 | 2 |

| DEPC水 | 6 |

4. 上机检测

程序设置：预变性95℃ 3 min；40循环（95℃ 10 s, 60℃ 30 s）；熔解曲线分析。

数据分析：根据Ct值及标准曲线计算样本浓度。

注意事项

分区操作：严格区分样本制备、试剂配制及扩增区，避免气溶胶污染。

阴性对照：每批次需包含无模板对照（NTC）。

结果判读：熔解曲线应为单一峰，否则需排查非特异扩增。

应用范围

仅限科研用途，不适用于临床诊断。

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