受体染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

受体染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒基于SYBR Green I染料法，适用于一步法实时荧光定量PCR检测，整合反转录与qPCR反应于同一体系，操作便捷且灵敏度高。适用于RNA/DNA模板的定量分析，广泛应用于基因表达研究、病原体检测及转基因成分鉴定等领域。

产品组分

2×预混缓冲液：含优化反应缓冲体系、dNTPs及SYBR Green I染料。

酶混合液：耐热反转录酶（如Hifair® V）和热启动Taq DNA聚合酶（如UNICON® HotStart）。

无核酸酶水：用于稀释模板或调整反应体积。

阳性对照（部分型号提供）：无传染性DNA片段，用于标准曲线构建。

保存条件

长期保存：-20℃避光保存，有效期24个月，避免反复冻融。

短期使用：4℃可稳定保存3个月。

性能参数

灵敏度：RNA检测下限达0.1 pg（高表达靶标），DNA检测可至单拷贝。

重复性：复孔间变异系数（CV）<5%。

线性范围：覆盖5个数量级（如10²–10⁷拷贝/μL）。

仪器兼容性：支持No Rox/Low Rox/High Rox平台（如ABI、Bio-Rad、Roche等机型）。

操作步骤

标准曲线制备（定量检测需选做）：

将阳性对照梯度稀释（如10²–10⁷拷贝/μL），独立操作避免污染。

反应体系配制（20 μL示例）：

2×预混液 10 μL

引物各0.4 μL（终浓度0.2 μM）

模板RNA/DNA 2 μL

无核酸酶水补至20 μL。

程序设置：

反转录：50℃ 15分钟（RNA模板需选）→ 预变性：95℃ 5分钟 → 扩增：95℃ 10秒，60℃ 30秒（40循环）→ 熔解曲线分析。

注意事项

应用限制：仅限科研使用，不可用于临床诊断或治疗。

污染控制：建议在超净台操作，使用带滤芯枪头。

熔解曲线：需验证扩增特异性，单峰表明无非特异性产物。

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