油菜源性成分染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

油菜源性成分染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

试剂盒组分

PCR反应预混液：含SYBR Green荧光染料、dNTPs、Mg²⁺、缓冲液等。

引物混合液：针对油菜源性成分（如PEP基因或其他特异性序列）设计的特异性引物。

阳性质控品：950μL×1管（无传染性DNA片段，浓度1×10⁸拷贝/μL）。

阴性质控品：50μL×1管（无模板对照，用于排除污染）。

说明书：1份（含操作流程、数据分析方法等）。

注意：不同批号组分不可混用。

适用仪器与耗材

仪器：支持SYBR Green通道的荧光定量PCR仪。

耗材：无核酸酶的0.2mL PCR管、滤芯吸头（10/200/1000μL）、离心机等。

样品要求

样本类型：食品、植物组织、加工品等需检测油菜源性成分的样本。

样本处理：

提取DNA时避免交叉污染，建议使用商品化核酸提取试剂盒。

短期保存于-20℃，长期保存需-70℃（不超过6个月）。

运输：2~8℃冰袋运输，严禁反复冻融。

操作方法

标准曲线制备（定量检测需选做）：

将阳性质控品梯度稀释（10²~10⁷拷贝/μL），每个浓度设3复孔。

PCR反应体系（20μL）：

预混液10μL + 引物2μL + 模板DNA 2μL + ddH₂O补至20μL。

扩增程序：

预变性：95℃ 5分钟；

循环阶段：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（40循环，采集荧光信号）；

熔解曲线分析：60~95℃（验证扩增特异性）。

结果判读

定性检测：Ct值≤35且熔解曲线为单一峰，判为阳性。

定量检测：根据标准曲线计算模板浓度（线性范围10²~10⁷拷贝/μL）。

注意事项

实验需在独立洁净区域进行，避免气溶胶污染。

阳性质控品仅用于验证实验有效性，不可直接作为样本检测。

若需定制其他基因（如抗药性基因、转基因元件），可联系提供特异性引物设计服务。

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