格特隐球菌染料法荧光定量PCR试剂盒

格特隐球菌染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

检验原理

采用SYBR Green染料法实时荧光PCR技术，针对格特隐球菌基因保守区域设计特异性引物，通过荧光信号实时监测核酸扩增过程，实现定性或定量分析。

试剂组成

格特隐球菌扩增液（50μL×1管）

2×qPCR Magic Mix（500 μL，棕色管）

荧光PCR专用模板稀释液（1 mL，黄盖）

qPCR引物混合液（100 μL，白盖）

阳性对照（1管）

性能特点

高特异性：引物针对格特隐球菌专一区设计。

高灵敏度：荧光定量技术较常规PCR更灵敏。

便捷性：即开即用，仅需提供DNA模板；闭管操作降低污染风险。

稳定性：试剂经优化，适用于20μL反应体系。

操作步骤

样本准备：自备样品DNA，建议浓度≥10 ng/μL。

试剂配制：

融化试剂后混匀，短暂离心。

按比例配制反应体系。

上机检测：

设置扩增程序：预变性（95℃, 2 min）→循环阶段（95℃ 15 s, 60℃ 30 s，40次）。

数据分析：

定量分析：通过标准曲线计算样本浓度。

定性分析：Ct值＜40判为阳性，无Ct值或≥40为阴性。

注意事项

分区操作：样本处理、试剂配制、加样需在不同区域进行。

污染控制：使用一次性耗材，实验后以10%次氯酸或75%酒精消毒台面。

储存与运输：

试剂避光保存，运输需冰袋密封。

避免反复冻融。

质量控制

阴性对照：应无Ct值或Ct≥40。

阳性对照：需显示典型扩增曲线且Ct值＜40。

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