草莓黄单胞菌染料法荧光定量PCR试剂盒

草莓黄单胞菌染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒基于染料法荧光定量PCR技术，专用于检测草莓黄单胞菌（Xanthomonas fragariae），具有高灵敏度和特异性。适用于科研用途，支持定性和定量分析，定量线性范围达5个数量级，检测灵敏度为100拷贝/反应。

产品规格

规格：50次/盒（20μL体系）

保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月；低温运输。

适用仪器：ABI、安捷伦MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf等荧光定量PCR仪。

试剂盒组分

预混PCR反应液（含优化引物、染料等）

阳性对照（1×10^8拷贝/μL）

DEPC-H₂O（无核酸酶水）

注：需自备样品DNA及核酸提取试剂。

实验流程

1. DNA提取

使用兼容的核酸提取试剂盒制备样本DNA，建议在样本制备区操作。

2. 标准曲线制备（定量检测需执行）

标记6管（7~2号），依次加入45 μL DEPC-H₂O。

梯度稀释阳性对照：

7号管：5 μL阳性对照（1×10^8拷贝/μL）→ 1×10^7拷贝/μL。

6号管：取5 μL 7号管溶液→ 1×10^6拷贝/μL。

重复稀释至2号管，获得1×10^2~1×10^7拷贝/μL的标准曲线。

每次稀释需更换带滤芯枪头，避免交叉污染。

3. PCR反应体系配制

按20μL体系混合：

10μL预混PCR反应液

2μL模板DNA（样本或标准品）

8μL DEPC-H₂O

短暂离心后上机检测。

注意事项

分区操作：样本制备、试剂配制、扩增需严格分区，避免污染。

质量控制：每批次实验需包含阴性对照（DEPC-H₂O）和阳性对照。

假阴性判断：若阳性对照未检出，需排查操作或试剂问题。

结果分析

定性：Ct值≤35且扩增曲线呈S型判为阳性。

定量：根据标准曲线计算样本拷贝数。

声明

本产品仅限科研使用，不适用于临床诊断。

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