鼠肺炎病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 新品

鼠肺炎病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒

商品属性

产品特点

即开即用：预混优化引物、探针及反应体系，用户仅需提供样品RNA模板。

高灵敏度：引物与探针针对鼠肺炎病毒保守区域设计，检测限低至10^2拷贝/μL。

高特异性：不与常见呼吸道病毒（如埃可病毒等）发生交叉反应。

质控完善：含阳性对照（定量分析需标准曲线，定性分析需1个阳性对照），可有效排除假阴性。

实验流程

RNA提取：

使用兼容的核酸提取试剂盒纯化样品RNA，建议提取N+2个样本（含阴性/阳性对照）。

反应体系配制（20μL/管）：

定量分析：需标记N+9管（N+2样本管、1阴性对照管、6标准曲线管）。

定性分析：需标记N+4管（N+2样本管、1阴性对照管、1阳性对照管）。

按比例加入预混液、引物探针、模板RNA（阴性对照以水替代）。

qPCR程序设置：

逆转录：50℃ 15分钟；预变性：95℃ 2分钟；扩增：95℃ 15秒→60℃ 1分钟（40循环）。

自备耗材与设备

灭菌离心管（1.5mL/2.0mL）及PCR管（0.2mL/八联管）

移液器（10μL-1000μL）及灭菌吸头

辅助设备：离心机、涡旋混匀器、金属浴、均质机、电子天平等

性能参数

特异性：引物经生物信息学验证，确保100%种属特异性。

灵敏度：最低检出限0.1%，无需增菌即可检测103cfu/mL浓度样本。

重现性：经多批次验证，重复性达100%。

注意事项

操作规范：阳性对照需最后加样，避免污染。

数据判读：Ct值≤35且扩增曲线呈S型判为阳性；阴性对照无扩增。

运输与存储：避免反复冻融，开封后分装保存。

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