人腺病毒F40型染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

人腺病毒F40型染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

检测原理

本试剂盒采用染料法荧光定量PCR技术，针对人腺病毒F40型基因组高度保守区域设计特异性引物，通过实时监测荧光信号变化，实现对病毒核酸的定性和定量检测。检测灵敏度可达100拷贝/反应，线性范围覆盖5个数量级。

产品组成

预混液：含DNA聚合酶、dNTPs、缓冲液及荧光染料。

引物混合液：优化设计的特异性引物。

阳性对照：无传染性的HAdV-F40 DNA片段（用于标准曲线制备）。

阴性对照：无核酸酶水。

自备试剂与仪器

自备试剂：待测样品DNA模板（建议纯度A260/A280为1.8-2.0）。

适用仪器：

ABI 7500/QuantStudio系列

安捷伦MX3000P/3005P

Roche LightCycler

Bio-Rad CFX系列

Eppendorf RealPlex4

操作步骤

1. 标准曲线制备

将阳性对照DNA片段梯度稀释（10^2-10^7拷贝/μL），分装至标记管中。

每管取5μL稀释液作为模板，与15μL预混液混合。

2. 样品检测

反应体系（20μL）：

预混液10μL

引物混合液2μL

模板DNA 5μL

无核酸酶水补至20μL。

PCR程序：

预变性：95℃ 3分钟

循环阶段（40次）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）

结果判读

定性检测：Ct值≤35且扩增曲线呈S型判为阳性。

定量检测：根据标准曲线计算样品拷贝数。

注意事项

操作需在无菌环境下进行，避免交叉污染。

试剂解冻后需充分混匀，避免反复冻融。

本产品仅限科研使用，不可用于临床诊断。

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