猴泡沫病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 新品

产品特点

高灵敏度：采用SYBR Green染料法，可检测低至10拷贝/μL的病毒核酸。

特异性强：引物针对SFV基因组高度保守区设计，避免与其他病原体交叉反应。

操作简便：即开即用，兼容常规核酸提取试剂盒，用户仅需提供模板RNA/DNA。

双重功能：支持定性与定量分析，定量线性范围达5个数量级（10^1~10^6拷贝/μL）。

质控完善：含阳性对照（标准品）与无模板对照（NTC），有效排除假阴性/假阳性。

实验流程

1. 样本制备

使用商品化RNA提取试剂盒（如Trizol法）从血液、组织或细胞培养物中提取病毒RNA，建议DNase处理以去除基因组DNA污染。

2. 试剂配制（样本制备区）

解冻试剂组分（预混酶、引物、缓冲液等），离心后按比例混合（具体体积参考厂商手册）。

标准曲线制备：将阳性对照梯度稀释（建议5-6个浓度点），用于定量分析。

3. PCR扩增（扩增区）

反应程序：

逆转录（50℃ 15-30分钟）→ 预变性（95℃ 2分钟）→ 循环阶段（95℃ 15秒，60℃ 30-60秒，40循环）。

荧光信号采集：建议在延伸步骤结束时读取SYBR Green信号（FAM通道）。

4. 数据分析

阈值（Threshold）设定：以3-15循环的荧光信号标准差10倍为基线。

定量计算：通过标准曲线拟合CT值，计算样本病毒载量。

技术参数

反应体系：20μL/反应，50次检测规格

应用范围：科研用途（非临床诊断），兼容定性与定量检测

标准品制备（示例：6点梯度稀释）

标记离心管（编号7至2对应10⁷-10²拷贝/μL梯度）

使用带滤芯枪头操作，每管加入45μL专用稀释液

梯度稀释应在独立洁净区完成，避免气溶胶污染

注意事项

分区操作：严格区分样本制备区、试剂配制区和扩增区，避免气溶胶污染。

质量控制：每批次实验需包含阴性对照（NTC）以监测污染，阳性对照验证试剂活性。

适用范围：仅限科研使用，不可用于临床诊断。

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