乙酸(acetic acid)含量测定试剂盒微板法/48样 新品

乙酸(acetic acid)含量测定试剂盒/48样

产品简介：
乙酸（Acetic acid）在食品、饮料和其他材料中的普遍存在，是重要的检测指标之一。

乙酸（Acetic acid）在乙酸激酶和磷酸转乙酰酶的相继作用下，使乙酸和 ATP 转变成乙酰辅酶 A 和 ADP ，继而在丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶依次催化 NADH 氧化生成 NAD+ ，通过检测 340nm 下 NADH 的下降量，进而计算得到乙酸含量的多少。

试剂盒的组成和配制：

所需仪器和用品：
酶标仪、96 孔板、低温台式离心机、恒温培养箱、可调式移液器、研钵、水浴锅、冰。

乙酸含量测定：
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样品和实验流程，避免样本和试剂浪费！

1、样本制备：

① 生物组织样本：称取约 0. 1g 组织(水分充足的果实样本取约 0.5g  组织或更多) ，加入1mL 提取液，进行冰浴匀浆。可于 80℃条件下孵育 20min(可使组织样本中干扰测定的酶蛋白变性失活) 。取出冷却至室温后，再于 12000rpm ，室温离心 10min ，取上清，置冰上待测。

【注】：若是非生物组织样本如食品等，可冰浴匀浆后，直接于 12000rpm，室温离心 10min，取上清，置冰上待测。

【注】：若增加样本量，可按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1 ：5~ 10 的比例进行提取。

② 液体样品：

a.  近似中性的液体可直接取 1mL 至 EP 管中；12000rpm ，离心 10min ，上清液待测。

b.  酸性液体(PH<5)样本，则需先用 KOH（2M）调溶液的 PH 值至约 7.5 ，并在室温下孵育 30 分钟。取 1mL 转移到 EP 管中；12000rpm ，离心 10min ，上清液待测。

c.  若蛋白浓度比较高的样本如牛乳等，可直接取 1mL 牛乳液体样本至 EP 管中，于 80℃条件下孵育 20min（可使部分蛋白变形沉淀析出）。取出冷却至室温后，再于12000rpm ，室温离心 10min ，取上清，置冰上待测。

③ 细胞/细菌样本：

先收集细菌或细胞到离心管内，离心弃上清；取 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液；冰浴超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 20％或 200W ，超声 3S ，间隔 10S ，重复 30次）；12000rpm ，4℃离心 10min ，取上清液，置冰上待测。

【注】：也可按照细菌或细胞数量(104 个):提取液体积(mL)为 500~ 1000:1 的比例进行提取。