人胚心肌细胞；HEH

人胚心肌细胞；HEH

商品属性

来源：取材自11周男性胚胎心肌组织，由中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心建立。

形态特性：贴壁生长。

应用范围：仅科研使用，禁止用于临床或体外诊断。

培养条件

培养基：

基础培养基：DMEM-H（含4.5g/L葡萄糖，添加1.5g/L NaHCO₃）。

补充成分：10%-20%胎牛血清（FBS），具体比例根据实验需求调整。

培养环境：

气相：95%空气 + 5% CO₂；温度37℃；湿度70%-80%。

细胞处理指南

复苏步骤

快速解冻：将冻存管置于37℃水浴中轻柔摇晃，1分钟内完全融化（避免水面浸没管盖）。

稀释离心：加入4mL预温培养基混匀，1000 RPM离心4分钟，弃上清后重悬于1-2mL新鲜培养基。

接种培养：转移至培养瓶/皿中，补足8mL培养基，24小时后换液。

传代方法（贴壁细胞）

消化：弃旧培养基，PBS润洗后加入0.25%胰酶-EDTA（1-2分钟，37℃），显微镜下观察至细胞变圆脱落。

终止消化：加入含血清培养基终止反应，离心后按1:2至1:5比例分瓶传代。

冻存方案

冻存液：90%完全培养基 + 10% DMSO（现配现用）。

步骤：消化收集细胞，重悬于冻存液后转移至冻存管，液氮长期保存。

质量控制与储存

复苏存活率：标准条件下≥60%，优化操作可达80%-90%。

储存要求：接收后立即转入液氮保存，避免反复冻融。

注意事项

严格无菌操作，避免污染。

传代密度建议维持80%-90%汇合度。

DMSO具有细胞毒性，解冻后需充分稀释并尽快离心去除。
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