人胚肾细胞+copGFP;HEK293-copGFP-puro 新品

人胚肾细胞+copGFP;HEK293-copGFP-puro

商品属性

细胞背景：人胚肾细胞（HEK293）通过慢病毒转导稳定表达 copGFP（一种优化的绿色荧光蛋白），并携带 嘌呤霉素（Puromycin）抗性基因。

应用领域：荧光标记示踪、药物筛选、基因表达研究、细胞互作实验等。

产品参数

| 参数 | 描述 |

| 细胞类型 | HEK293（人胚肾上皮细胞） |

| 荧光标记 | copGFP（激发波长: 488 nm，发射波长: 507 nm） |

| 抗性基因 | Puromycin（推荐筛选浓度：1-3 μg/mL，需用户验证） |

| 培养条件 | DMEM（高糖）+ 10% FBS + 1% Pen/Strep + 2 μg/mL Puromycin（维持培养） |

| 冻存液 | 90% FBS + 10% DMSO |

| 支原体检测 | 阴性 |

培养与处理指南

细胞复苏

快速解冻后转移至含完全培养基的离心管，离心（1000 rpm, 5 min），弃上清，重悬后接种于培养瓶。

注意：初始48小时建议添加额外Puromycin（2 μg/mL）以维持筛选压力。

传代与扩增

推荐传代比例：1:3至1:6（80%汇合时）。

传代步骤：PBS洗涤 → 0.25%胰酶消化 → 完全培养基终止消化。

荧光稳定性

长期培养时建议定期用Puromycin处理（每3-5代）以避免GFP表达丢失。

质量控制

荧光验证：>95% 细胞表达copGFP（流式检测或荧光显微镜观察）。

无菌检测：细菌、真菌、支原体阴性。

活力检测：复苏后存活率≥90%（台盼蓝染色）。

注意事项

Puromycin敏感性：初次使用前需滴定最佳筛选浓度（建议1-3 μg/mL梯度测试）。

荧光衰减：避免长时间强光照射，分选后建议重新筛选。

存储条件：液氮长期保存；避免反复冻融。

规格：1×10⁶ cells/vial

运输：干冰或液氮运输

保存：≤-80°C（短期），液氮（长期）
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