人胚肾细胞；ExpiHEK-293F 新品

人胚肾细胞；ExpiHEK-293F

商品属性

英文名称：Human Embryonic Kidney ExpiHEK-293F Cell Line (STR authenticated)

来源：HEK293细胞经基因工程改造的悬浮衍生株，专为高密度无血清培养优化，STR鉴定位点（Amelogenin、D3S1358等）与ATCC标准HEK293图谱一致。

核心特征：

生长特性：完全悬浮生长，无贴壁依赖，呈单个或小团状（团块直径<50μm）

高密度能力：摇瓶培养密度可达1.5×10⁷ cells/mL（常规HEK293F仅8×10⁶ cells/mL）

表达优势：转染后蛋白产量是普通293F的3-10倍，尤其适合复杂修饰蛋白（如抗体、病毒样颗粒）

培养条件

培养基 Expi293 Expression Medium，无需添加血清或生长因子

培养环境 37℃、8% CO₂、摇床转速125-150 rpm（振幅25mm），湿度≥80%

传代方法 离心传代法（细胞密度达4-6×10⁶ cells/mL时操作）：

1. 取细胞悬液1000rpm离心5分钟，弃上清

2. 用新鲜培养基重悬至2×10⁶ cells/mL，按1:2-1:4比例接种

3. 每天监测细胞密度和活率（台盼蓝染色活率需>90%）

冻存液 90% Expi293培养基 + 10% DMSO（现配），推荐密度1×10⁷ cells/mL，程序降温后液氮保存

研究应用

作为工业级蛋白表达平台，核心应用场景包括：

单克隆抗体制备：

瞬时转染7-10天可收获mg级抗体，支持高通量候选药物筛选

案例：PD-1/PD-L1抗体片段表达量可达500-1000 mg/L

病毒载体生产：

腺相关病毒（AAV）滴度达10¹³ vg/mL，慢病毒滴度10⁸ TU/mL

适合基因治疗载体的大规模生产（200L生物反应器放大）

疫苗研发：

新冠病毒刺突蛋白（S蛋白）、HPV病毒样颗粒（VLP）高效表达

配合ExpiFectamine™ 293转染试剂，转染效率>95%

关键操作注意事项

悬浮培养核心参数控制：

溶氧（DO）：维持30%-50%饱和度（生物反应器），摇瓶培养需确保摇床转速≥125 rpm

pH值：培养基pH应控制在7.2-7.4，避免CO₂浓度波动导致pH骤变

转染效率最大化技巧：

使用ExpiFectamine™ 293转染试剂盒，DNA:试剂比例=1μg:2.5μL

转染时细胞密度2.5×10⁶ cells/mL，转染后4-6小时添加Enhancer（按试剂盒说明书）
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