人胚肝二倍体细胞；CCC-HEL-1 (STR)

人胚肝二倍体细胞；CCC-HEL-1 (STR)

商品属性

来源：由中国医学科学院基础医学研究所于1980年建立，源自3个月龄人胚胎肝脏组织，经原代培养和克隆纯化获得，STR鉴定正确（位点含Amelogenin、D3S1358、TH01等，核型为46,XX）。

核心特征

二倍体特性：保留正常人类二倍体核型，无致瘤性（软琼脂克隆形成实验阴性）

肝细胞功能：表达白蛋白、细胞色素P450酶（CYP1A2、CYP3A4），可代谢部分肝毒物

生长特性：贴壁生长，成纤维细胞样形态（部分区域呈上皮样）

细胞类型：人胚胎肝正常细胞株

细胞纯度：≥94%

细胞活力：≥98%（台盼蓝排除法检测）

生物安全性检测：不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母及真菌

保存与运输

保存方式：

新鲜细胞：建议收到后立即放入37℃、5% CO₂培养箱静置2-3小时后再操作。

冻存细胞：液氮冻存（基础培养基+10% DMSO+20%胎牛血清），或短期保存于-80℃冰箱。

运输方式：

干冰运输（冻存管形式）或活细胞运输（T-25培养瓶）。

培养条件

培养基：Grace's Insect Medium（含10%胎牛血清，不含BSA、FCS及全蛋超滤物）。

血清浓度调整：

初始接种时若细胞密度较低，可提高血清浓度至15%；

细胞汇合度达80%时，维持10%血清浓度。

培养环境：37℃、5% CO₂，培养瓶盖需轻微拧松以保证气体交换。

细胞处理与传代

贴壁细胞观察：

显微镜下检查细胞汇合度，若未超过80%，保留5-10 mL培养基继续培养；若超过80%，需传代。

传代步骤：

弃去旧培养基，用PBS或Hanks’液轻柔洗涤细胞；

消化后按1:3比例分瓶传代，2-3天传代一次。

悬浮细胞处理：离心（1000 rpm，3分钟）后重悬于新鲜培养基。

注意事项

生物安全：需在二级生物安全柜内操作，废液及接触器皿需高压灭菌处理。

质量控制：建议定期检测细胞形态、生长状态及污染情况。

用途限制：仅科研使用，不可用于临床诊断。
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