人黑色素瘤细胞；MNT-1

商品属性

种属/组织 人 / 淋巴结转移灶

疾病 黑色素瘤 (Melanoma)

生长特性 贴壁生长

细胞形态 多为成纤维细胞样（Fibroblast-like），也有文献描述为上皮样

核心特征 高色素沉着，富含黑素体

培养条件与注意事项

培养液pH调节

CO2张力控制：根据NaHCO3浓度调整培养箱CO2浓度（2.0 g/L对应5%，3.7 g/L对应10%）。

瓶盖松紧度：避免过紧，建议松开1/4圈以保障气体交换。

缓冲系统：若NaHCO3缓冲不足，可改用不依赖CO2的培养液或添加HEPES（终浓度10–25 mM）。

盐浓度适配

CO2环境：使用基于Earle′s盐配制的培养液。

大气环境：改用Hanks盐配制的培养液。

细胞处理步骤

细胞复苏

迅速解冻冻存管（37℃水浴），加入4mL培养基混合。

离心（1000 rpm，4分钟），弃上清，重悬于1-2mL新鲜培养基。

转移至培养瓶或10cm皿（补足8mL培养基），过夜培养后换液。

细胞传代

弃旧培养基，PBS洗涤后加入胰酶消化（37℃，1-2分钟）。

终止消化并吹打成单细胞悬液，按比例接种至新培养器皿。

细胞冻存

冻存液配方：90%血清 + 10% DMSO（现配现用）。

程序降温后转移至液氮长期保存。

注意事项

需定期检测支原体污染。

建议使用对数生长期细胞进行实验（密度达80%-90%时传代）。

不同批次血清可能影响生长状态，需优化条件。

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