人骨肉瘤细胞+LUC;U20S-LUC-PURO 新品

商品属性

细胞背景

该细胞系源于1964年从一名15岁女性患者的胫骨肉瘤组织中分离建立（原代号2T），经STR鉴定确认。未检测到SV40、RSV或腺病毒污染，表达胰岛素样生长因子（IGF-Ⅰ/Ⅱ）受体及骨肉瘤衍生生长因子（ODGF）。荧光素酶（LUC）标记和嘌呤霉素抗性（PURO）基因通过慢病毒转染稳定整合，适用于体内外生物发光成像及抗性筛选实验。

细胞特性

种属来源：人

组织来源：骨（中等分化肉瘤）

形态：上皮样，贴壁生长

标记基因：荧光素酶（LUC）、嘌呤霉素抗性（PURO）

培养体系：McCoy's 5A培养基 + 10% FBS + 1% 青霉素/链霉素（P/S）

培养条件：37℃、5% CO₂

规格与保存

常规规格：1×10⁶ cells/T25培养瓶或冻存管

保存条件：液氮冻存（-196℃）或短期-80℃保存，需避光防冻融。

运输条件：干冰运输（需额外支付干冰费用）或活细胞专用保温箱。

质量控制

无菌检测：支原体、细菌、真菌检测阴性。

功能验证：荧光素酶活性检测（需提供D-荧光素底物激发信号）。

抗性验证：嘌呤霉素（1-2 μg/mL）筛选维持抗性。

使用说明

复苏步骤：

快速解冻后离心去除冻存液，重悬于完全培养基。

接种于预温的培养器皿，24小时后更换培养基以去除死细胞。

传代建议：

80%-90%融合时，用0.25%胰酶消化，按1:3至1:4比例传代。

标记基因维持：

每2-3代需用嘌呤霉素（1 μg/mL）处理48小时以维持抗性。

注意事项

避免反复冻融，解冻后建议立即使用。

荧光素酶活性检测需避光操作，底物D-荧光素建议现配现用。

实验前需通过梯度浓度测试确定最佳嘌呤霉素筛选剂量。

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