脂肪酸合成酶(FAS)测定试剂盒/微量法/96S

脂肪酸合成酶(FAS)测定试剂盒/微量法/96S

测定意义：

FAS 是脂肪酸合成关键酶，催化乙酰辅酶 A 和丙二酰辅酶 A 而生成长链脂肪酸。FAS 普遍表达于各种组织细胞中，在哺乳动物肝、肾、脑、肺和乳腺以及脂肪组织中表达丰富。

测定原理：

FAS 催化乙酰 CoA 、丙二酰 CoA 和 NADPH 生成长链脂肪酸和 NADP+ ；NADPH 在 340nm 有吸收峰，而NADP+没有；通过测定 340nm  光吸收下降速率，计算 FAS 活性。

自备仪器和用品：

研钵、冰、台式离心机、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、可调式移液枪和蒸馏水。

粗酶液提取：
1. 组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为 1 ：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 试剂一）进行冰浴匀浆。12000g ，4℃离心40min，取上清置冰上待测。

2. 细菌、真菌：按照细胞数量（104 个）：试剂一体积（mL）为 500~1000 ：1 的比例（建议 500 万细胞加入 1mL 试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w ，超声 3 秒， 间隔 7 秒，总时间 3min）；然后12000g ，4℃, 离心 40min，取上清置于冰上待测。

3. 血清等液体：直接测定。

注 意：

正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。