小麦矮腥黑穗病菌染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

小麦矮腥黑穗病菌染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性：

检测原理：

小麦矮腥黑穗病菌染料法荧光定量PCR试剂盒‌是一种基于SYBR Green I染料法的分子检测工具，用于快速、灵敏地定性检测小麦、大

麦等样本中的‌小麦矮腥黑穗病菌‌（Tilletia controversa）DNA，适用于种子检疫、田间监测及科研实验。

核心特点：

‌即开即用‌：用户只需提供DNA模板，操作简便。

‌高灵敏度‌：可检测低至100拷贝/反应的靶标。

‌高特异性‌：引物针对病菌保守序列设计，避免交叉反应。

‌双重用途‌：支持定性检测，定量时线性范围达5个数量级。

‌配套齐全‌：含阳性质控（含已知浓度DNA片段）和阴性质控（无模板对照），便于结果验证。

样本采集与处理：

‌样本类型‌：小麦种子、籽粒、植株组织或土壤悬浮液。

‌采集方法‌：

‌种子样本‌：取10-100g种子，加入无菌水（含0.1%湿润剂）振荡10分钟，收集悬浮液。

‌土壤样本‌：取表层5cm土壤，过筛后与无菌水混合离心浓缩。

‌保存与运输‌：短期2-8℃保存（≤24小时），长期需-70℃冷冻，避免反复冻融。

注意事项‌：

一、实验操作注意事项

‌分区操作‌：实验需严格分试剂准备区、样本处理区、扩增区，避免交叉污染。

‌试剂处理‌：使用前需完全解冻并混匀，短暂离心后使用，不同批号试剂不可混用。

‌废弃物处理‌：实验废弃物需经121℃高压灭菌30分钟处理。

二、结果判读与质控

‌基线设定‌：循环6-15；‌阈值‌：超过阴性质控曲线峰值。

‌判读标准‌：

阴性质控：Ct值≥40或无扩增曲线。

阳性质控：Ct值≤35且有S形扩增曲线。

样本：Ct值≤35且扩增曲线呈指数增长判为阳性。

三、常见问题排查

‌无Ct值‌：检查循环数、程序设置、引物/探针降解、模板量及抑制剂。

‌阴性对照扩增‌：排查反应体系污染、标本交叉污染、引物二聚体及浓度问题。

‌熔解曲线多峰‌：优化引物设计、浓度及退火温度。

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