人纤维肉瘤细胞；HT-1080+CXCR4(h)-Puro 新品

                                                          人纤维肉瘤细胞；HT-1080+CXCR4(h)-Puro
产品信息：

1. 细胞基本档案

参数维度  详细信息

中文名称  转染人源CXCR4基因的人纤维肉瘤细胞

种属/来源  人源（结缔组织；纤维肉瘤）

细胞形态  上皮细胞样

生长特性  贴壁生长

主要应用  肿瘤转移机制、CXCR4信号通路、药物靶点研究

筛选标记  Puromycin (嘌呤霉素)

背景基因  含有活化的 N-ras 癌基因

2. 详细培养条件

该细胞系在普通 HT-1080 培养条件基础上，需维持嘌呤霉素筛选压力以保持 CXCR4 基因的稳定表达。

基础培养基： 推荐使用 DMEM (高糖) 或 RPMI-1640。

血清添加： 添加 10% 胎牛血清 (FBS)。

双抗： 建议添加 1% 青霉素-链霉素 (P/S)。

筛选抗生素： 嘌呤霉素 (Puromycin)。通常维持浓度为 1-4 μg/mL（具体浓度请参考构建该细胞系的说明书或进行杀灭曲线测定）。

培养环境：

温度：37℃

气体：5% CO₂，95% 空气

湿度：饱和湿度

 详细操作流程指南

细胞复苏

快速解冻： 将冻存管从液氮中取出，迅速放入 37℃ 水浴中摇晃，约 1 分钟内融化。

转移离心： 在生物安全柜内，将细胞悬液转移至含有 5-10mL 预热完全培养基的离心管中，混匀。

离心洗涤： 1000 RPM（约 150g）离心 5 分钟，弃去上清液。

接种培养： 用含嘌呤霉素的完全培养基重悬细胞，接种至 T25 培养瓶。

换液： 复苏后第二天建议换液，去除死细胞并补充新鲜抗生素。

细胞传代（贴壁细胞）

时机： 细胞密度达到 80%-90% 汇合度时。

消化液： 建议使用 0.25% 胰蛋白酶-EDTA 消化液。

操作步骤：

弃去旧培养基，用无钙镁 PBS 缓冲液润洗细胞 1 次。

加入 1-2 mL 消化液，置于 37℃ 培养箱中消化 1-2 分钟，镜下观察细胞变圆脱落。

加入含血清的完全培养基终止消化，轻轻吹打混匀。

1000 RPM 离心 5 分钟，弃上清。

加入含嘌呤霉素的新鲜完全培养基重悬。

传代比例： 建议 1:2 至 1:5 传代。

换液频率： 每 2-3 天 更换一次培养液。

细胞冻存

冻存液配方： 推荐使用 90% FBS + 10% DMSO，或专用的无血清冻存液。

程序： 使用程序降温盒（或置于 -80℃ 冰箱过夜），随后转入液氮罐长期保存。

⚠️ 4. 关键注意事项

嘌呤霉素筛选： 为了维持 CXCR4 基因的稳定表达，培养基中必须持续添加 嘌呤霉素。若长时间不加压，转染的基因可能会丢失。

运输脱落问题： HT-1080 细胞系（包括其转染株）在运输过程中极易因震荡而脱落。请勿丢弃漂浮的细胞。处理方法是将培养瓶中的培养基收集到离心管中，离心（1000 RPM, 5min）收集沉淀，用新鲜培养基重悬后重新接种。

STR 鉴定： 建议在实验开始前进行 STR 鉴定，以确保细胞系的身份纯正，防止交叉污染。

用途限制： 该细胞系仅用于科学研究，不可用于诊断、治疗或人体临床实验。

公司正在出售的产品：

Anti-RICTOR 雷帕霉素靶蛋白复合体2抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml	Anti-prox-1 prox-1抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml
Anti-ERAB 内质网Aβ相关结合蛋白抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml	Rhesus antibody Rh CREG1 E1A激活基因刺激蛋白1抗体 规格 0.2ml
SNX6 英文名称： 分选连接蛋白6抗体 0.2ml	ASA(Human aryl sulfatase A) ELISA Kit 人芳基酯酶A
Anti-Fibulin 1/FITC 荧光素标记抗“衰老关键蛋白”抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	phospho-cardiac Troponin I (Thr143) 英文名称： 0酸化心肌肌钙蛋白抗体 0.2ml
Anti-Camk1g 钙/钙调蛋白依赖蛋白激酶IG抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml	phospho-MEK2(Ser226) 英文名称： 0酸化原活化蛋白激酶激酶2抗体 0.1ml
CYP7A1 英文名称： 细胞色素P450 7A1抗体/胆固醇7a羟化酶 0.2ml	Anti-Osx /FITC 荧光素标记成骨相关转录因子抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
Anti-LY-96/MD-2 MD-2蛋白抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml	Anti-Oct-4 /FITC 荧光素标记胚胎干细胞关键蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
Anti-Camk1g 钙/钙调蛋白依赖蛋白激酶IG抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml	CD63/MLA1 溶酶体膜糖蛋白抗原 0.5mg
Rhesus antibody Rh Mouse Anti-Goat IgG/Cy3 Cy3标记的小鼠抗羊IgG 规格 0.1ml	人纤维肉瘤细胞；HT-1080+CXCR4(h)-PuroRhesus antibody Rh DLX4 DLX4抗体 规格 0.2ml
Anti-Phospho-SHIP2 (Tyr986/987) 0酸化蛋白酪氨酸0酸酶2抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml	Anti-CDK2 周期素依赖性激酶2抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

细胞具体特点如下：

环境与营养：需无菌环境、精确的温度（36-37℃）和pH（7.2-7.4），动物细胞常需血清，植物细胞需激素。

生长方式：贴壁细胞需表面附着，悬浮细胞自由漂浮，半贴壁半悬浮兼具两者特性。

传代与密度：贴壁细胞需胰酶消化传代，悬浮细胞直接分瓶；密度达80%-90%时需传代，避免营养枯竭与代谢抑制。

敏感性：对剪切应力、污染、温度变化敏感，需定期更换培养液清除代谢物。

应用与局限：便于活细胞观察与实验控制，但体外环境与体内存在差异，长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。