人结肠癌细胞耐药奥沙利铂；HCT-116+OX耐药(8ug/mLOxaliplatin) 新品

                                                          人结肠癌细胞耐药奥沙利铂；HCT-116+OX耐药(8ug/mLOxaliplatin)
产品信息：

HCT-116+OX 细胞系基本参数

种属/来源  人源 (Human)

组织来源  结肠腺癌 (Colon Adenocarcinoma)

耐药特性  对 奥沙利铂 (Oxaliplatin) 具有稳定耐药性

维持浓度  8 µg/mL (部分文献或批次可能为 10 µg/mL，请以随货说明书为准)

细胞形态  上皮细胞样 (Epithelial-like)

生长特性  贴壁生长 (Adherent)

培养基  McCoy's 5A

生物安全等级  BSL-1

培养条件与参数

HCT-116+OX 细胞的培养条件与其亲本细胞 HCT-116 基本一致，但必须添加奥沙利铂以维持耐药性。

1. 培养基配方

基础培养基：McCoy's 5A (这是 HCT-116 系列细胞的推荐培养基，优于 DMEM/RPMI-1640)。

添加成分：

10% 胎牛血清 (FBS)

1% 青霉素-链霉素双抗 (P/S)

8 µg/mL 奥沙利铂 (Oxaliplatin) (用于维持耐药筛选压力)

2. 培养环境

温度：37℃

气体环境：5% CO₂ + 95% 空气

湿度：70% - 80%

细胞培养操作步骤

1. 收货与适应 (针对 T25 培养瓶)

消毒：收到细胞后，用 75% 酒精擦拭瓶身消毒。

静置：放入 37℃ 培养箱静置 2-4 小时，让细胞适应环境。

换液：显微镜下观察细胞状态。建议弃去运输用的培养基（灌液），用 PBS 洗涤一次，换用含 8 µg/mL 奥沙利铂 的新鲜完全培养基。

2. 细胞传代 (当细胞密度达 80%-90% 时)

HCT-116+OX 为贴壁细胞，推荐传代比例为 1:2 至 1:3。

弃液与清洗：吸去旧培养基，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

消化：加入适量 0.25% 胰蛋白酶 (Trypsin-EDTA)，约 1 mL/瓶，置于 37℃ 培养箱消化 1-3 分钟。

镜检：在显微镜下观察，待细胞变圆、间隙变大并脱落时，立即终止消化。

终止与吹打：加入含血清的完全培养基终止消化，轻轻吹打使细胞完全脱落。

离心与分瓶：1000 RPM 离心 5 分钟，弃上清，用含药（8 µg/mL Oxaliplatin）的新鲜培养基重悬沉淀，按 1:2 的比例分装到新的培养瓶中。

3. 细胞冻存

冻存液：90% FBS + 10% DMSO。

密度：建议冻存密度为 1×10⁶ 个活细胞/mL。

步骤：消化收集细胞，离心洗涤，用冻存液重悬，分装入冻存管。使用程序降温盒或置于 -80℃ 冰箱过夜，随后转入液氮罐长期保存。

⚠️ 注意事项与常见问题

维持筛选压力（关键）：为了防止耐药性丢失，在培养基中必须持续添加奥沙利铂（通常为 8 µg/mL，具体浓度请参照供应商提供的说明书）。如果进行药敏实验（如 CCK-8），则需在实验前撤药培养一段时间（通常 2-3 代），以消除药物残留对实验结果的干扰。

运输培养基处理：运输用的培养基（灌液）通常不可直接继续培养，需更换为含药的新鲜完全培养基。

培养基选择：HCT-116 系列细胞对培养基有偏好，McCoy's 5A 是最佳选择，使用 DMEM 或 RPMI-1640 可能会导致细胞状态不佳或生长缓慢。

复苏操作：由于是耐药株，复苏后建议尽快加入含药培养基进行培养，以维持其耐药表型的稳定性。

科研用途：该细胞系仅用于科研实验，不可用于临床治疗。

公司正在出售的产品：

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孕激素诱导阻断因子抗体 Anti-PIBF 0.2ml	5-HT ELISA Kit 大鼠5羟色胺
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Anti-NKB 神经激肽B抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml	IDUA(Human Alpha-L-iduronidase) ELISA Kit 人αL艾杜糖苷酸酶Multi-class antibodies规格： 48T
AAT(Alpha-1Anti-tiypsin) α-1抗胰蛋白酶(抗原)Multi-class antibodies规格： 0.5mg	CD62E(Human E-Selectin) ELISA kit 人E选择素
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Anti-VSV-G tag VSV-G tag标签抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml	CD133 造血干细胞抗原CD133 0.5mg

细胞具体特点如下：

环境与营养：需无菌环境、精确的温度（36-37℃）和pH（7.2-7.4），动物细胞常需血清，植物细胞需激素。

生长方式：贴壁细胞需表面附着，悬浮细胞自由漂浮，半贴壁半悬浮兼具两者特性。

传代与密度：贴壁细胞需胰酶消化传代，悬浮细胞直接分瓶；密度达80%-90%时需传代，避免营养枯竭与代谢抑制。

敏感性：对剪切应力、污染、温度变化敏感，需定期更换培养液清除代谢物。

应用与局限：便于活细胞观察与实验控制，但体外环境与体内存在差异，长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。