293T/ACE2(人胚肾细胞) 新品

                                                          293T/ACE2(人胚肾细胞)
产品信息：

293T/ACE2 细胞系基本参数

种属/来源  人源 (Human)

背景来源  胚胎肾组织 (HEK-293T)

基因修饰  过表达 hACE2 (人血管紧张素转化酶2)

细胞形态  上皮细胞样 (Epithelial-like)

生长特性  贴壁生长 (Adherent)

培养基  DMEM (高糖)

抗性筛选  通常含有 Puromycin (嘌呤霉素) 筛选压力

生物安全等级  BSL-2 (涉及病毒实验需在P3实验室进行)

�� 培养条件与参数

293T/ACE2 细胞继承了 293T 细胞的生长特性，但通常需要特定的抗性筛选。

1. 培养基配方

基础培养基：DMEM (高糖)。

添加成分：

10% 胎牛血清 (FBS)

1% 青霉素-链霉素双抗 (P/S)

1 µg/mL Puromycin (嘌呤霉素，用于维持ACE2表达，具体浓度视实验室条件而定)

2. 培养环境

温度：37℃

气体环境：5% CO₂ + 95% 空气

湿度：70% - 80%

�� 细胞培养操作步骤

1. 收货与适应 (针对 T25 培养瓶)

消毒：收到细胞后，用 75% 酒精擦拭瓶身消毒。

静置：放入 37℃ 培养箱静置 2-4 小时，让细胞适应环境。

换液：显微镜下观察细胞状态。建议弃去运输用的培养基（灌液），用 PBS 洗涤一次，换用含嘌呤霉素的新鲜完全培养基。

2. 细胞传代 (当细胞密度达 70%-90% 时)

注意：293T/ACE2 细胞通常贴壁较弱，容易脱落。

传代比例：1:2 至 1:5。

操作步骤：

收集：由于贴壁弱，培养基中可能含有悬浮细胞。先收集培养基到离心管中。

清洗与消化：用 PBS 洗去死细胞，加入少量胰酶（0.25% Trypsin-EDTA）消化瓶壁上的贴壁细胞。

合并：将消化下来的细胞与之前收集的悬浮细胞合并。

离心：1000 RPM 离心 5 分钟。

重悬与分瓶：弃上清，用完全培养基重悬细胞，按比例分装到新的培养瓶中。

3. 细胞冻存

冻存液：90% FBS + 10% DMSO，或商业冻存液。

密度：建议冻存密度为 1×10⁶ 个活细胞/mL。

⚠️ 注意事项与常见问题

贴壁较弱：这是 293T 系列细胞的通病。在运输或移动培养箱时，细胞容易成片脱落。建议操作轻柔，若发现细胞脱落，可离心收集后重新接种。

维持筛选压力：为了保证细胞持续高表达 ACE2 受体，建议在培养基中持续添加 Puromycin。如果不加抗性维持，ACE2 的表达量可能会随传代次数增加而下降。

pH 敏感：293T 细胞对 pH 值较敏感，若培养基偏酸（变黄），细胞状态会变差。建议勤换液，并确保 CO₂ 浓度稳定。

STR 鉴定：该细胞的 STR 图谱应与 HEK-293T 一致，建议定期进行支原体检测和细胞鉴定。

公司正在出售的产品：

Cathepsin C/DPP1 英文名称： 组织蛋白酶C抗体 0.1ml	Anti-ER-Beta 雌激素受体β抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml
(CTX- I )ELISA Kit 大鼠Ⅰ型胶原C端肽	ACA-IgG ELISA Kit 大鼠抗心0脂抗体IgG
Anti-Phospho-eNOS (Thr495)/FITC 荧光素标记0酸化合成酶3抗体(内皮型)IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	Rhesus antibody Rh IL-20RB/IL-20R2 白介素20受体β链抗体 规格 0.2ml
Anti-CD56/NCAM1 神经细胞粘附分子1抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml	PDGFAA + PDGFBB 英文名称： 血小板源性生长因子AA+BB抗体 0.1ml
Claudin 7 英文名称： 紧密连接蛋白7抗体 0.2ml	Connexin-29 英文名称： 间隙连接蛋白29抗体 0.1ml
Rhesus antibody Rh beta COP β衣被蛋白抗体 规格 0.2ml	Anti-E.coli O157/HRP 辣根过氧化物酶标记抗大肠埃希氏菌O157抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
EME1 英文名称： 减数分裂内切酶EME1抗体 0.2ml	3-Mar 英文名称： 膜相关环指蛋白3抗体 0.2ml
eEF1A1 英文名称： 翻译延伸因子EF-1a抗体 0.2ml	HABP ELISA Kit 大鼠透明质酸结合蛋白Multi-class antibodies规格： 48T
TOPO II Alpha/DNA TP II Alpha (DNA topoisomerase II Alpha) DNA拓普西异构酶Ⅱ抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg	293T/ACE2(人胚肾细胞)Anti-DISC1(NT)/FITC 荧光素标记DISC1 N端抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
anti-phospho-Beta-catenin(Tyr142) 0酸化β 连环素蛋白抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml	Rhesus antibody Rh OLIG2 少突胶质细胞转录因子2抗体 规格 0.2ml

细胞具体特点如下：

环境与营养：需无菌环境、精确的温度（36-37℃）和pH（7.2-7.4），动物细胞常需血清，植物细胞需激素。

生长方式：贴壁细胞需表面附着，悬浮细胞自由漂浮，半贴壁半悬浮兼具两者特性。

传代与密度：贴壁细胞需胰酶消化传代，悬浮细胞直接分瓶；密度达80%-90%时需传代，避免营养枯竭与代谢抑制。

敏感性：对剪切应力、污染、温度变化敏感，需定期更换培养液清除代谢物。

应用与局限：便于活细胞观察与实验控制，但体外环境与体内存在差异，长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。