人肺微血管内皮细胞;HPMVEC 新品

人肺微血管内皮细胞;HPMVEC

商品属性

组织来源 人肺组织微血管

细胞形态 长梭形、多角形（铺路石样）

生长特性 贴壁生长

主要应用 肺炎症研究、血管通透性研究、肿瘤转移机制、药物筛选

生长培养基：MCDB131基础培养基（不含L-谷氨酰胺），补充10ng/ml EGF、1μg/ml氢化可的松、10mM谷氨酰胺、10%胎牛血清（FBS）、1%青霉素-链霉素（P/S）。

培养条件：

气相环境：95%空气，5% CO₂；

温度：37℃恒温；

湿度：70%-80%。

细胞培养操作指南

细胞复苏

步骤：

从液氮中取出冻存管，立即置于37℃水浴中轻摇至完全融化（约1-1.5分钟）。

将细胞悬液转移至含10ml预温培养基的15ml离心管中，1000rpm离心5分钟。

弃上清，用1ml新鲜培养基重悬细胞，接种至含10ml培养基的培养皿中，均匀摇晃后置于CO₂培养箱。

24小时后更换培养基，此后每2-3天换液一次。

细胞传代

时机：细胞融合度达80%-90%时进行。

步骤：

弃旧培养基，用PBS（无钙镁）轻柔洗涤细胞1-2次。

加入0.25%胰蛋白酶-EDTA消化液（覆盖细胞层），37℃消化1-2分钟，显微镜下观察细胞变圆后立即加入等体积含血清培养基终止消化。

吹打收集细胞悬液，1000rpm离心5分钟，弃上清后以新鲜培养基重悬。

按1:2至1:5比例分瓶传代，补充培养基至8ml/瓶。

细胞冻存

冻存液配方：70%完全培养基 + 20% FBS + 10% DMSO（逐滴加入，混匀）。

步骤：

消化离心后细胞用冻存液重悬，分装至冻存管（1×10⁶ cells/管）。

程序降温：4℃ 30分钟 → -20℃ 30分钟 → -80℃过夜，最终转移至液氮长期保存。

质量控制与注意事项

STR鉴定：建议定期进行短串联重复序列（STR）分析以确保细胞株真实性。

无菌操作：全程需在超净工作台内完成，避免污染。

形态特性：贴壁生长，形态为典型内皮细胞铺路石样排列。
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