T2 (174xcem.T2 )人淋巴母细胞 新品

商品属性

别名 T2 (174xCEM.T2); 174xCEM.T2; CEMx721.174.T2

组织来源 外周血淋巴细胞（由 CEM 和 174 细胞融合构建）

细胞形态 淋巴母细胞样（圆形）

生长特性 悬浮生长（但部分细胞会松散贴壁，吹打即下）

功能特性 抗原加工缺陷：不表达 HLA-DR，用于研究 MHC I 类抗原呈递

生物安全等级 BSL-1 / BSL-2

标识数据（STR鉴定）：

Amelogenin: X | CSF1PO: 11,12 | D13S317: 11,12

D16S539: 10,12 | THO1: 6,7,9.3 | TPOX: 8,12

培养条件

基础培养基：RPMI-1640

血清补充：10%-20%胎牛血清（FBS），推荐15%以平衡生长与稳定性

气体环境：37℃, 5% CO₂, 95%空气，湿度70%-80%

换液频率：每周2-3次

倍增时间：40-60小时

细胞复苏流程

拆封处理：

酒精擦拭T25培养瓶外壁，拆封后立即移入37℃、5% CO₂培养箱。

静置2-3小时稳定细胞状态（勿摇动）。

初次培养：

保留瓶内原有培养液，作为初期培养基（可提高存活率）。

待细胞密度达90%时传代，后续逐步替换为自配培养基。

细胞传代步骤

消化离心：

PBS清洗3次 → 加0.25%胰酶2ml → 37℃消化3-5分钟（显微镜下观察脱落）。

终止消化后离心（1000rpm，5min），弃上清。

重悬分瓶：

按1:2至1:3比例分装至新培养瓶，补充预温培养基。

细胞冻存指南

冻存液配方：90% FBS + 10% DMSO

步骤：对数生长期收集 → 离心后重悬于冻存液 → 分装冻存管 → 液氮长期保存。

关键注意事项

空泡现象：高密度培养时出现大空泡属正常特性，不影响功能。

污染防控：

严格无菌操作，定期支原体检测。

建议添加1%青霉素-链霉素双抗预防污染。

传代时机：悬浮细胞需监测密度，避免过度密集（影响状态）。

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