中性蛋白酶(NP)测定试剂盒/分光光度法/24样 新品

中性蛋白酶(NP)测定试剂盒/分光光度法/24样

测定意义：

NP 在一定的温度和中性 pH 条件下，催化水解蛋白质。由于其安全无毒、水解能力强、作用范围广等特点，中性蛋白酶常用于食品、饲料、化妆品和营养保健品生产。

测定原理：

中性条件下，NP 催化酪蛋白水解产生酪氨酸；在碱性条件下，酪氨酸还原磷钼酸化合物生成钨蓝；在 680nm有特征吸收峰。

自备仪器和用品：

可见分光光度计、水浴锅、磁力搅拌器、可调式移液枪、1mL 玻璃比色皿、1.5 mL EP 管和蒸馏水。

测定操作：

1. 分光光度计预热30min ，调节波长到 680 nm，蒸馏水调零。

2. 试剂二、试剂三和试剂四置于 30℃水浴保温30min。

3. 对照管：取一支 EP 管，加入 100μL 粗酶液，200μL 试剂二，混匀后置于 30℃水浴保温 10min；加入 200μL试剂三，混匀后 8000g ， 4℃离心 10min；取 200μL 上清液，加入新的 EP 管，再加入 1000μL 试剂四，200μL试剂五，混匀后置于 30℃水浴保温20min ，于 680nm 测定光吸收，记为 A 对照管。

4. 测定管：取一支 EP 管，加入 100μL 粗酶液，200μL 试剂三，混匀后置于 30℃水浴保温 10min；加入 200μL试剂二，混匀后 8000g ， 4℃离心 10min；取 200μL 上清液，加入新的 EP 管，再加入 1000μL 试剂四，200μL试剂五，混匀后置于 30℃水浴保温20min ，于 680nm 测定光吸收，记为 A 测定管。（注意与空白管不同，先加试剂三，后加试剂二）

5. 空白管：取 EP 管，加入 200μL 蒸馏水，1000μL 试剂四，200μL 试剂五，混匀后置于 30℃水浴保温20min ，于 680nm 测定光吸收，记为 A 空白管。

6. 标准管：取 EP 管，加入 200μL 标准品，1000μL 试剂四，200μL 试剂五，混匀后置于 30℃水浴保温20min ，于 680nm 测定光吸收，记为 A 标准管。

注 意：

空白管和标准管只需要测定一次。