维生素B7(VB7)含量测定试剂盒/48样

维生素B7(VB7)含量测定试剂盒/48样

测定意义：

维生素是人和动物为维持正常的生理功能而必须从食物中获得的一类微量有机物质，在人和动物生长、代谢、发育过程中发挥着重要的作用。维生素大致可分为脂溶性和水溶性两大类，水溶性维生素主要包括维生素 C 和 B 族维生素。

维生素 B7 即生物素（Biotin），是水溶性维生素，生物素是多种羧化酶的辅酶，在羧化酶反应中起 CO2 载体的作用。

测定原理：

维生素 B7 在 210 nm 下有吸收峰，可以利用高效液相色谱法测定其含量。

自备仪器和用品：

高效液相色谱仪、低速离心机、溶剂抽滤装置、氮吹仪、涡旋振荡器、针头式过滤器（有机系，50 个，0.22μm）、滤膜（水系和有机系各 1 个，0.45μm）、耐水 C18 柱（4.6       ×250 mm）、可调式移液器、样品瓶（50 个，2mL）、内衬管（50 个，放置在样品瓶内用于微量样品进样）、乙腈（色谱级，100 mL）和超纯水。

维生素 B7 含量测定操作步骤：
1.   开启电脑、检测器和泵，安装上色谱柱，打开软件，在方法组中设置进样量 10   μL，流速 0.8 mL/min，柱温 25℃,保留时间20min，检测波长 210 nm，设置完毕保存方法组。

2.  用流动相过柱子，待基线稳定后开始加样。

3.   加入标准品 10   μL，在 20min  内可分离维生素 B7，维生素 B7 的保留时间在 13.5min 左右，（柱子不同，保留时间有差异），计算不同浓度的维生素 B7 标准品的峰面积。

4.  加入样品 10 μL，在相应保留时间处检测维生素 B7 的峰面积。

注 意：

1 、 整个操作过程应注意低温、避光。

2 、 为了避免使用过程中柱压过大，流速由小到大调节。

3 、 标准品的稀释倍数要根据样品中维生素 B7 浓度确定，样品中维生素 B7 的峰面积必须落在不同浓度的维生素 B7 标准品的峰面积之内，该标准品稀释倍数只是一个参考。