双缩脲法蛋白含量测定试剂盒/微量法/96S

双缩脲法蛋白含量测定试剂盒/微量法/96S

测定意义：

样品可溶性蛋白质含量常常用于酶活性计算。此外，可溶性蛋白质含量也用于食品等质量分析。

测定原理：

强碱性溶液中，双缩脲与 CuSO4 形成紫色络合物；紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比，而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关，故可用来测定蛋白质含量。该方法测定范围为 1~10mg 蛋白质，适用于蛋白质浓度高的样品，尤其是动物材料。

自备仪器和用品：

离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、移液器和蒸馏水。

测定操作：
1.  分光光度计/酶标仪预热 30 min ，调节波长到 540 nm，蒸馏水调零。

2.  空白管：取 0.5mL EP 管，加入 40μL 蒸馏水，200μL 试剂一，混匀后室温静置 15 min ，取 200μL 于微量玻璃比色皿/96 孔板，540nm 比色，记为 A 空白管。

3.  标准管：取 0.5mL EP 管，加入 40μL 标准液，200μL 试剂一，混匀后室温静置 15 min ，取 200μL 于微量玻璃比色皿/96 孔板，540 nm 比色，记为 A 标准管。

4.  测定管：取 0.5mL EP 管，加入 40μL 待测液，200μL 试剂一，混匀后室温静置 15 min ，取 200μL 于微量玻璃比色皿/96 孔板，540nm 比色，记为 A 测定管。

注 意：

正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定，确保蛋白浓度在 1～10mg/ml 范围内。