人ALK阳性间变性大细胞淋巴瘤；SU-DHL-1 新品

人ALK阳性间变性大细胞淋巴瘤；SU-DHL-1

商品属性

别名：SUDHL1、SuDHL-1、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1

物种来源：人源（胸腔积液转移，男性）

细胞类型：间变性大细胞（ALK阳性）

生长特性：悬浮生长

形态特征：圆形细胞

培养条件与操作规范

传代方法：

传代比例：1:2至1:4（首次建议1:2）

消化条件：室温胰酶消化1-3分钟（若为贴壁亚型需调整）。

换液频率：每周2-3次（悬浮细胞需离心保留细胞沉淀）。

培养基：通用培养基（如RPMI-1640+10% FBS）。

无菌操作：严格避免污染，建议在生物安全柜中操作。

背景信息

疾病模型：源于ALK阳性间变性大细胞患者胸腔积液，常用于发病机制、靶向及药物筛选研究。

操作指南

1. 细胞复苏

快速解冻：37℃水浴快速摇晃，1-2分钟内使冻存液完全融化。

稀释：将含细胞的冻存液转移至离心管，缓慢加入4-5mL预热完全培养基。

离心：1000 rpm (约 150-200g) 离心 3-5 分钟。

重悬：弃上清，加入新鲜完全培养基重悬细胞。

接种：接种于 T25 培养瓶，放入培养箱培养。

观察：次日观察贴壁情况，建议更换新鲜培养基以去除死细胞。

2. 细胞传代 (关键步骤)

时机：细胞密度达到 80%-90% 融合度时进行传代。

洗涤：吸去旧培养基，用 PBS 轻轻润洗细胞 1 次。

消化：加入适量 0.25% Trypsin-EDTA，37℃ 培养箱中消化 1-2 分钟。

观察：显微镜下观察，待细胞大部分变圆并脱落时，立即加入完全培养基终止消化。

吹打：轻轻吹打使细胞完全脱落并混匀。

离心与分装：

1000 rpm 离心 3-5 分钟。

弃上清，加入新鲜培养基重悬。

按 1:2 至 1:3 的比例分装到新瓶中。

3. 细胞冻存

收集：按传代方法收集对数生长期的细胞。

计数：调整细胞密度至 1×106 ～ 1×1071×107 cells/mL。

配制冻存液：推荐使用 90% FBS + 10% DMSO。

分装：将细胞悬液分装入冻存管（1mL/管）。

梯度降温：

使用程序降温盒（-1℃/min）放入 -80℃ 冰箱过夜。

次日转入液氮罐长期保存。

质量控制

STR鉴定：提供STR图谱以确保细胞系真实性。

支原体检测：阴性（标准流程验证）。

运输与保存：液氮冻存或干冰运输，复苏后需稳定传代3代以上再用于实验。

应用限制

仅限科学研究，不可用于临床或动物实验
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