LN229+LUC人胶质瘤细胞荧光素酶标记 新品

商品属性

母系来源 LN229 (人胶质母细胞瘤细胞)

标记基因 Luciferase (荧光素酶)

抗性基因 通常携带 Puro (嘌呤霉素) 抗性

物种来源 人 (Homo sapiens)

组织来源 脑 (额顶枕叶胶质母细胞瘤)

细胞形态 上皮细胞样

生长特性 贴壁生长

标记类型：稳定表达荧光素酶（Firefly Luciferase, LUC）

应用：肿瘤研究、体内外生物发光成像（BLI）、药物筛选、转移模型构建等。

规格：

冻存细胞：1 × 10^6 cells/vial

培养状态细胞：T25培养瓶（贴壁生长，80%密度）

储存条件：液氮（冻存细胞）或37℃培养（活细胞）

关键特性

荧光素酶活性：

稳定表达Firefly Luciferase基因，可通过D-荧光素底物产生生物发光信号。

推荐底物：150 μg/mL D-Luciferin（需单独购买）。

细胞背景：

亲本细胞LN229：人胶质母细胞瘤细胞系，EGFR扩增、PTEN突变，常用于肿瘤侵袭和放疗研究。

标记方法：慢病毒转导或质粒转染，经抗生素（如Puromycin）筛选获得稳定株。

检测数据：

发光强度：约1×10^8 RLU/10^6 cells（需验证仪器条件）。

稳定性：连续传代10代后荧光素酶活性保持>90%。

培养条件

培养基：DMEM（高糖）+ 10% FBS + 1% Pen/Strep + [筛选抗生素，如2 μg/mL Puromycin]。

培养环境：37℃, 5% CO₂。

传代比例：1:3至1:5（每2-3天传代，80%汇合时）。

质量控制

无菌检测：支原体、细菌、真菌阴性（ELISA/PCR验证）。

荧光素酶表达：流式细胞术或发光检测确认>95%阳性率。

实验流程示例（体内成像）

细胞准备：皮下或原位注射LN229-LUC细胞（如5×10^5 cells/小鼠）。

成像步骤：

注射D-Luciferin（150 mg/kg，腹腔注射）。

10分钟后用IVIS成像系统检测发光信号。

注意事项

冻存细胞复苏后需稳定培养1-2代再实验。

长期培养建议定期用抗生素维持筛选压力。

避免反复冻融，推荐使用专业细胞冻存液（如90% FBS + 10% DMSO）。

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