NK-92 MI人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞 新品

NK-92 MI人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞

商品属性

别称 NK-92 MI; NK-92 mi; NK92-MI; NK92MI; NK-92 transfected with MFG-Hil2

种属 人类

年龄（性别） 男性，50岁

组织来源 外周血

生长特性 悬浮细胞

细胞形态 淋巴母细胞样

背景描述 

NK-92细胞是从一位患有急进性非霍奇金淋巴瘤的50岁白人男性外周血单核细胞衍生来的一株IL-2依赖型NK细胞株。NK-92MI细胞是转染得到的源自NK-92细胞的IL-2非依赖的NK细胞株。亲本细胞NK-92通过微粒体基因转化法用逆转录病毒MFG-hIL-2载体携带的人IL-2cDNA进行转化。可能由于载体整合到基因组DNA中，转化是稳定的。这株细胞对很多恶性细胞有细胞毒性；铬释放试验显示它能杀死K562细胞和Daudi细胞。NK-92细胞有以下特征：CD2、CD7、CD11a、CD28、CD45、CD54表面标记阳性；CD1、CD3、CD4、CD5、CD8、CD10、CD14、CD16、CD19、CD20、CD23、CD34和HLA-DR表面标记阴性。其亲本IL-2依赖的细胞株NK-92细胞及另一株同样来源于NK-92细胞株的IL-2非依赖的细胞株NK-92CI都可从ATCC得到。NK-92MI细胞和NK-92CI细胞这两个变种都包含、表达并合成hIL-2cDNA。NK-92MI细胞合成的IL-2水平比NK-92CI高，而亲本细胞不合成表达。1998年9月提交到ATCC的培养物污染了支原体，其后代通过BM细胞周期蛋白处理21天消除支原体。处理后6周，用Hoechst染色、PCR和标准培养测试进行支原体检测，结果都呈阴性。

生物安全等级 2

生长培养基 MEMα＋0.2mM Inositol＋0.1mM β-mercaptoethanol＋0.02mM Folic Acid＋12.5% HS＋12.5% FBS＋1% P/S

推荐传代比例 5×10^5-1×10^6cells/mL

推荐换液频率 2~3次/周

冻存条件

冻存液：90% FBS+10% DMSO

温度：液氮

培养条件

气相：空气，95%；CO2，5%

温度：37℃

注意事项 该细胞为悬浮细胞，请注意离心收集细胞悬液；请勿直接倒掉细胞培养液。

保藏机构 ATCC; CRL-2408用。

关键特性

表面标记：

阳性表达：CD2、CD7、CD11a、CD28、CD45、CD54，CD56（高亮表达）。

阴性表达：CD1、CD3、CD4、CD5、CD8、CD10、CD14、CD16、CD19、CD20、CD23、CD34及HLA-DR。

功能应用：

用于血液系统恶性肿瘤（如）的体外免疫清除研究。

经辐照处理后可避免增殖风险，同时保留对靶细胞的杀伤功能。

注意事项

培养条件：需使用含IL-2的培养基（原代NK-92为IL-2依赖型，NK-92 MI为IL-2非依赖型）。

安全性：实验操作需符合生物安全二级（BSL-2）标准。

冻存与复苏

冻存液配方：55%基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO，保存于液氮。

复苏步骤：

干冰运输后立即转入-80℃冰箱过夜，再移至液氮或直接复苏。

37℃水浴快速解冻，离心去除冻存液，重悬于完全培养基。

接种于培养瓶，静置2-3小时待贴壁后观察状态。
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