NCI-N87+LUC人胃癌细胞荧光素酶标记 新品

NCI-N87+LUC人胃癌细胞荧光素酶标记

商品属性

种属：人

别称：NCI-N87+LUC

组织来源：胃管腺癌转移灶（肝脏）

疾病背景：胃管腺癌

标记方法：通过慢病毒转染稳定表达荧光素酶，需定期用嘌呤霉素维持荧光强度（建议传代8代后筛选）。

培养条件 

培养基：RPMI1640 + 10%胎牛血清 + 1%双抗；或专用培养基。

传代比例：1:2至1:3，消化时间5-10分钟。

培养环境：37℃、5% CO₂，湿度70%-80%，倍增时间约48-80小时。

冻存条件：90% FBS + 10% DMSO，或非程序冻存液。

细胞特性

形态：上皮细胞样，贴壁生长。

受体表达：蕈毒碱胆碱受体、癌胚抗原（CEA）、TAG 72；不表达N-myc、L-myc、胃泌激素受体等。

致瘤性：可在裸鼠中成瘤。

STR鉴定：提供完整STR分型数据（如Amelogenin X/Y，CSF1PO 8/12等）。

运输与保存

冻存细胞：干冰运输（-80℃保存或直接复苏），发现干冰挥发或污染需立即联系供应商。

复苏活细胞：常温运输（T25瓶），收到后静置培养箱2-4小时再处理。

接收后操作

消毒处理：75%酒精擦拭瓶壁，显微镜观察细胞状态并拍照留存（10×,20×各2-3张）。

贴壁细胞处理：

静置2-3小时后观察贴壁情况（60%以下密度补6-8mL新培养基；70%-80%以上需传代）。

首次传代推荐比例：1:2（使用新配制培养基）。

复苏与传代

复苏步骤：

37℃水浴快速解冻细胞悬液，离心（1000rpm/5min）弃上清。

重悬于4-6mL完全培养基，培养过夜后换液。

传代步骤：

PBS洗涤细胞，加入0.25%胰蛋白酶消化1-2分钟（37℃）。

轻敲培养瓶使细胞脱落，加含血清培养基终止消化。

离心（1000rpm/8-10min）后重悬接种。

冻存要求

冻存液配方：90%无血清冻存液 + 10% DMSO。

注意事项

荧光维持：长期培养需嘌呤霉素筛选，避免荧光衰减。

专用培养基：若使用优化培养基，可直接培养无需调整。

用途限制：仅限科研，不可用于临床治疗。
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