NADPH-细胞色素C还原酶（NCR）检测试剂盒（分光光度法 50T/48S）

NADPH-细胞色素C还原酶（    NCR）试剂盒说明书

                                                  分光光度法 50管/48样

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定                                             

测定意义：

细胞色素P450酶是一组主要存在于肝脏的同工酶，在外源物质代谢中具有重要作用，尤其是药物和毒物的代谢。NCR作为P450酶系的重要一员，催化氧化型P450还原再生。

测定原理：

NCR催化NADPH还原氧化型细胞色素c生成还原型细胞色素c，还原型细胞色素c在550nm处有特征吸收峰；通过测定550nm吸光度的增加速率，来计算NCR活性。

自备仪器和用品：

可见分光光度计、普通离心机，超速离心机、可调式移液枪、1ml玻璃比色皿和蒸馏水。

粗酶液提取：

1、除去细胞核和线粒体等：称约0.5g组织，加入4℃预冷的1 ml试剂一，冰上充分研磨，10 000g 4℃离心30min，取上清液，转移到超速离心管中。

2、粗制微粒体：4℃，100 000g，离心60min，弃上清液。

3、除血红蛋白等杂质：向步骤2的沉淀中加1 ml试剂一，盖紧后充分震荡溶解，100 000g离心30min，弃上清液。

4、最终微粒体：向步骤3的沉淀中加试剂二0.5 ml，盖紧后充分震荡溶解，4℃保存待测。

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