1321N1人脑部多形性成釉细胞瘤细胞

                                                          1321N1人脑部多形性成釉细胞瘤细胞
产品信息：

1. 细胞基本档案

参数维度  详细信息

中文名称  人脑部多形性成釉细胞瘤细胞 / 人恶性胶质瘤细胞

种属/来源  人源（男性，47岁，脑组织）

细胞形态  上皮样细胞

生长特性  贴壁生长

产品规格  1 × 10⁶ cells/T25 培养瓶 或 1mL 冻存管

主要应用  脑胶质瘤机制研究、药物筛选（如替莫唑胺）、放射治疗研究

详细培养条件

1321N1 细胞属于贴壁细胞，培养条件相对标准，但对培养基成分有一定要求。

基础培养基： 推荐使用 DMEM (高糖) 培养基。

血清添加： 添加 10% 胎牛血清 (FBS)。

双抗： 建议添加 1% 青霉素-链霉素溶液 (P/S)。

培养环境：

温度：37℃

气体：5% CO₂，95% 空气

湿度：饱和湿度

��️ 3. 详细操作流程

细胞复苏

快速解冻： 将冻存管从液氮中取出，迅速放入 37℃ 水浴中摇晃，约 1 分钟内融化（留少许冰晶时取出）。

转移离心： 用酒精棉擦拭冻存管表面消毒，在生物安全柜内将细胞悬液转移至含有 5-10mL 预热完全培养基的离心管中，混匀。

离心洗涤： 1000 RPM（约 150g）离心 5 分钟，弃去上清液（去除残留 DMSO）。

接种培养： 用新鲜完全培养基重悬细胞，接种至 T25 培养瓶，放入培养箱静置培养。

换液： 复苏后第二天建议换液，去除死细胞和残留 DMSO。

细胞传代

时机： 细胞密度达到 80%-90% 汇合度时。

消化液： 建议使用 0.25% 胰蛋白酶-EDTA 消化液。

操作步骤：

弃去旧培养基，用无钙镁 PBS 缓冲液润洗细胞 1 次（可选，视细胞状态而定）。

加入 1-2 mL 消化液，置于 37℃ 培养箱中消化 1-3 分钟。

显微镜下观察，待细胞间隙变大、变圆并脱落时，加入含血清的完全培养基终止消化。

轻轻吹打混匀，使细胞完全分散。

将细胞悬液转移至离心管，1000 RPM 离心 5 分钟。

弃上清，加入新鲜完全培养基重悬。

传代比例： 建议 1:2 至 1:3 传代。

换液频率： 每 2-3 天 更换一次培养液。

细胞冻存

冻存液配方： 推荐使用 90% FBS + 10% DMSO，或专用的无血清冻存液。

程序： 使用程序降温盒（或置于 -80℃ 冰箱过夜），随后转入液氮罐长期保存。

⚠️ 4. 关键注意事项

STR 鉴定： 建议在实验开始前或细胞传代较多时进行 STR 鉴定，以确保细胞系的身份纯正，防止交叉污染。

支原体检测： 必须定期检测支原体，确保无污染，以免干扰实验结果。

运输方式： 通常采用干冰运输（冻存管）或常温运输（T25 培养瓶）。收到后请立即检查细胞状态。

贴壁不牢： 部分批次的 1321N1 细胞贴壁相对较弱，在运输或换液过程中容易脱落，这是正常现象。脱落的细胞可以通过离心收集并重新接种。

用途限制： 该细胞系通常标注为“仅供科研使用”，不可用于诊断、治疗或人体临床实验。

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生长方式：贴壁细胞需表面附着，悬浮细胞自由漂浮，半贴壁半悬浮兼具两者特性。

传代与密度：贴壁细胞需胰酶消化传代，悬浮细胞直接分瓶；密度达80%-90%时需传代，避免营养枯竭与代谢抑制。

敏感性：对剪切应力、污染、温度变化敏感，需定期更换培养液清除代谢物。

应用与局限：便于活细胞观察与实验控制，但体外环境与体内存在差异，长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。