IHEMD 人正常黑色素细胞永生化

                                                          IHEMD 人正常黑色素细胞永生化
产品信息：

一、 IHEMD 细胞基本参数

细胞类型  人正常皮肤黑色素细胞（经永生化处理）

形态特征  贴壁生长，树突状或成纤维细胞样（梭形）

生长特性  贴壁（需细胞外基质支持，如胶原或纤连蛋白）

生物安全等级  BSL-2

主要应用  色素代谢研究、美白化妆品原料测试、细胞毒性实验

培养条件与操作流程

�� 1. 推荐培养基体系

永生化的黑色素细胞通常比原代细胞更耐受，对血清要求相对宽泛，但为了维持其黑色素合成特性，建议使用专用培养基。

基础培养基： 常用 DMEM（高糖）或 Medium 254。

添加成分：

血清： 10% 胎牛血清（FBS）。部分永生化细胞系（如PIG1）在10% FBS下生长良好。

添加剂： 如果使用专用黑素细胞培养基（如M254），通常需添加配套的黑素细胞生长补充剂（HMGS），包含霍乱毒素（Cholera Toxin）、牛垂体提取物（BPE）等。

pH值： 维持在 7.2 - 7.4。

2. 培养环境

温度： 37℃

气体环境： 5% CO₂，95% 空气，饱和湿度。

�� 3. 传代操作（关键步骤）

黑色素细胞贴壁相对较弱，操作需轻柔。

消化液： 推荐使用 0.25% 胰蛋白酶 - 0.02% EDTA。

消化时间： 室温或37℃消化 1-2 分钟。

观察终点： 显微镜下观察细胞回缩变圆、间隙变大，且轻拍培养瓶壁细胞能随培养基波动脱落时，即为消化最佳时机。

终止消化： 加入含血清的完全培养基终止（血清可抑制胰酶活性）。

传代比例： 建议 1:2 至 1:3 传代。

注意事项： 避免过度消化，否则会导致细胞表面受体受损，影响后续贴壁。

❄️ 4. 冻存与复苏

冻存液： 90% FBS + 10% DMSO（程序降温盒）。

复苏： 快速37℃水浴解冻，离心去除DMSO后，重悬接种于预温的完全培养基中。

⚠️ 三、 培养中的常见问题与对策

细胞漂浮/不贴壁：

原因： 胰酶消化过度、运输途中脱落、培养瓶未经过包被。

对策： 严格控制消化时间；若运输后漂浮，可离心收集细胞，重悬后重新接种；对于难贴壁的细胞，可使用多聚赖氨酸（Poly-L-Lysine）预处理培养瓶。

细胞成团（岛屿状生长）：

原因： 吹打不均匀，或者细胞处于分裂旺盛期。

对策： 消化后吹打要轻柔但彻底，尽量将细胞团吹散。

黑色素颗粒过多：

现象： 细胞质内有大量黑色颗粒，背景较脏。

说明： 这是黑色素细胞的正常生理特征。但如果颗粒过多影响观察，可在培养基中添加低浓度的酪氨酸酶抑制剂（如曲酸），但这通常仅用于维持形态，不用于色素代谢实验。

污染防控：

黑色素细胞对环境敏感，一旦发现培养基浑浊或pH值骤降，需立即处理。建议在培养基中添加双抗（青霉素-链霉素）以预防细菌污染。

公司正在出售的产品：

Caspase-10 半胱胺酸蛋白酶-10(抗原) 0.5mg	Rhesus antibody Rh DNase gamma 脱氧核糖核酸酶γ抗体 规格 0.2ml
Anti-Phospho-FRA1 (Ser265) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠0酸化FRA-1蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	Rhesus antibody Rh HIP1R/HIP12/HIP3 亨丁顿舞蹈症相互作用蛋白12抗体 规格 0.2ml
PDXK 英文名称： 吡哆醛激酶抗体 0.2ml	Rhesus antibody Rh RGS2 G蛋白信号转导调节因子2抗体 规格 0.1ml
Anti-ZNF474/ZFP106 锌指蛋白474抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml	CDK-4(Human Cyclin-dependent kinase 4) ELISA Kit 人周期素依赖性激酶4Multi-class antibodies规格： 48T
Anti-HSD11B2/HSD2 羟基类固醇脱氢酶11β2抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml	Anti-phospho-ERK1(pThr202/pThr204)+phospho ERK2(pThr183/pTyr185)/FITC 荧光素标记抗人、大、小鼠0酸化原活化蛋白激酶1/2抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-mouse IgM 兔抗小鼠IgM 规格 1mg	Anti-Lpin1 protein Lpin1 抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml
Anti-Phospho-PEA15 (Ser116) /FITC 荧光素标记0酸化星形胶质细胞PEA15抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	Rhesus antibody Rh Cathepsin L/CTSL 组织蛋白酶L抗体 规格 0.1ml
Anti-Phospho-MAPKAPK2 (Thr222) /FITC 荧光素标记0酸化原活化蛋白激酶活化的蛋白激酶2抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	CD68 浓缩液 0.1ml 进口分装
a-Glu(Mouse Alpha-Glucosidase) ELISA Kit 小鼠α葡萄糖苷酶	IHEMD 人正常黑色素细胞永生化Rhesus antibody Rh DOG-1/TMEM16A 跨膜蛋白16A/钙激活氯离子通道抗体 规格 0.1ml
Anti-PSAP/PAP (human) 酸性0酸酶抗体(人)Multi-class antibodies规格： 0.1ml	ADCY1 英文名称： 腺苷酸环化酶1抗体 0.2ml

细胞具体特点如下：

环境与营养：需无菌环境、精确的温度（36-37℃）和pH（7.2-7.4），动物细胞常需血清，植物细胞需激素。

生长方式：贴壁细胞需表面附着，悬浮细胞自由漂浮，半贴壁半悬浮兼具两者特性。

传代与密度：贴壁细胞需胰酶消化传代，悬浮细胞直接分瓶；密度达80%-90%时需传代，避免营养枯竭与代谢抑制。

敏感性：对剪切应力、污染、温度变化敏感，需定期更换培养液清除代谢物。

应用与局限：便于活细胞观察与实验控制，但体外环境与体内存在差异，长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。