HCT116+LUC人结肠癌细胞荧光素酶标记

                                                          HCT116+LUC人结肠癌细胞荧光素酶标记
产品信息：

细胞基本档案

来源背景  源自一名男性结肠癌患者的肿瘤组织（结肠腺癌），1979年由M. Brattain等人分离建立。

标记方式  通过慢病毒转染技术，稳定整合了荧光素酶（Luc）基因。

生长特性  贴壁生长，形态呈上皮样（多边形）。

基因特征  携带 KRAS G13D 突变（激活型），属于微卫星不稳定型（MSI-H）。

生物安全  通常为二级生物安全水平，仅限科研使用。

�� 核心特性与优势

1. 生物发光能力（核心优势）

这是该细胞与普通HCT116细胞最大的区别。

原理：细胞表达荧光素酶，在底物（如D-荧光素）存在下会发生氧化反应并发出光子。

应用：利用活体成像系统（IVIS），研究人员可以在活体动物（如裸鼠）中实时、无创地监测肿瘤的生长、转移以及药物治疗效果，无需处死动物即可获得连续数据。

2. 优越的基因组稳定性

HCT116细胞系遗传背景清晰，基因组相对稳定，非常适合进行基因编辑（如CRISPR/Cas9技术）。

它常被用于研究DNA错配修复缺陷（MMR）、微卫星不稳定性（MSI）以及KRAS信号通路在结直肠癌中的作用。

3. 致瘤性强

该细胞在免疫缺陷小鼠（如裸鼠）体内具有很强的致瘤性，能形成上皮样肿瘤，是建立异种移植肿瘤模型（CDX模型）的理想选择。

�� 培养与维持条件

为了保证细胞状态良好以及荧光素酶的稳定表达，你需要严格遵循以下培养条件：

基础培养基：McCoy's 5A 培养基。

添加成分：

10% 优质胎牛血清（FBS）。

1% 双抗（青霉素-链霉素）。

培养环境：37℃，5% CO₂，湿度保持在70%-80%。

传代比例：当细胞密度达到80%-90%时进行传代，通常按 1:2 至 1:4 的比例分瓶。

消化液：0.25% 胰蛋白酶 - 0.53 mM EDTA，消化时间通常为1-3分钟。

⚠️ 关键注意事项（易错点）

在使用HCT116+LUC细胞时，有两点需要特别注意，否则可能导致实验失败：

荧光素酶表达的维持（嘌呤霉素筛选）

虽然它是稳定转染株，但随着传代次数的增加，部分细胞可能会丢失荧光素酶的表达，导致发光强度减弱。

解决方案：为了维持荧光强度，建议在培养基中加入嘌呤霉素（Puromycin）进行筛选。不同供应商的筛选浓度不同（通常在0.25 µg/ml - 5 µg/ml之间），建议参考具体的产品说明书或进行预实验确定最佳浓度。

支原体污染检测

支原体污染会严重影响细胞的生长状态和实验结果。建议定期（如每3个月）进行支原体检测。

公司正在出售的产品：

ASA(Human aryl sulfatase A) ELISA Kit 人芳基酯酶A	HOOK1 英文名称： HOOK1蛋白抗体 0.2ml
Beta-TG (Rabbit Beta-Thromboglobulin) ELISA Kit 兔子β血小板球蛋白/β环蛋白	Phospho-BLNK(Tyr189) 英文名称： 0酸化T淋巴细胞连接蛋白抗体 0.1ml
Anti-NT-3 神经营养因子-3抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml	ACEI 英文名称： 紧张素1转换酶抑制剂抗体 0.1ml
CGRP (calcitonin gene related peptide, CGRP) 降钙素基因相关肽Multi-class antibodies规格： 0.5mg	CD22 英文名称： B淋巴细胞粘附分子CD22抗体 0.1ml
Anti-PCNA/FITC 荧光素标记增殖细胞核抗原抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	CHAC2 英文名称： 阳离子转运调节样蛋白2抗体 0.1ml
aFGF-1 ELISA Kit 大鼠酸性成纤维细胞生长因子1	Anti- Beta-Amyloid(1-40)/FITC 荧光素标记β淀粉样肽(1-40)抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
FGFR1 peptide 碱性成纤维细胞生长因子受体-1(多肽抗原) 0.5mg	KIF1A 英文名称： 微管驱动蛋白家族成员1A抗体 0.1ml
ADH/VP/AVP(Human antidiuretic hormone/vasopressin/arginine vasopressin) ELISA Kit 人抗激素/加压素/精酸加压素	Anti-OAT4L/URAT1 /FITC 荧光素标记尿酸盐重吸收转运子1抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
Anti-Adenosine A2A-R/FITC 荧光素标记腺苷A2A受体抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	HCT116+LUC人结肠癌细胞荧光素酶标记TPO-Ab ELISA Kit 大鼠抗甲状腺过氧化物酶抗体Multi-class antibodies规格： 48T
Anti-Bmi1/PCGF4/FITC 荧光素标记组蛋白相关Bmi1抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	Human matrilysin,MAT ELISA Kit 人基质裂解蛋白/基质溶素Multi-class antibodies规格： 48T

细胞具体特点如下：

环境与营养：需无菌环境、精确的温度（36-37℃）和pH（7.2-7.4），动物细胞常需血清，植物细胞需激素。

生长方式：贴壁细胞需表面附着，悬浮细胞自由漂浮，半贴壁半悬浮兼具两者特性。

传代与密度：贴壁细胞需胰酶消化传代，悬浮细胞直接分瓶；密度达80%-90%时需传代，避免营养枯竭与代谢抑制。

敏感性：对剪切应力、污染、温度变化敏感，需定期更换培养液清除代谢物。

应用与局限：便于活细胞观察与实验控制，但体外环境与体内存在差异，长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。