中华鳖心肌来源细胞；CSSTH1

                                                          中华鳖心肌来源细胞；CSSTH1
产品信息：

来源与背景

CSSTH1细胞系源自中华鳖（Pelodiscus sinensis）心肌组织，属上皮样贴壁细胞，是研究爬行动物心脏生理及比较医学的重要模型。

形态与生长

形态：多边形上皮样，胞质均匀，核居中。

生长特性：贴壁生长，汇合度达80%-90%时需传代，推荐传代比例1:2至1:3。

鉴定与质量控制

物种验证：细胞角蛋白-18（CK-18）免疫荧光染色阳性。

支原体检测：阴性（供应商提供检测报告）。

二、培养操作指南

培养条件

基础培养基  RPMI-1640

血清添加  10%-20%胎牛血清（FBS）

添加剂  1%双抗（青霉素/链霉素）

培养环境  28-30℃、5% CO?（或常氧培养）

传代比例  1:2至1:3（汇合度80%-90%时传代）

冻存条件  90%完全培养基 + 10% DMSO，液氮保存

操作步骤

复苏

37℃水浴快速解冻冻存管，转移至含5 mL完全培养基的离心管，1000 rpm离心5 min。

弃上清，细胞沉淀用完全培养基重悬，接种至T25瓶，28℃培养箱静置3-4小时后观察。

传代

PBS清洗贴壁细胞，加入1 mL 0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化1-2分钟。

显微镜下观察细胞变圆脱落，加入完全培养基终止消化，离心（1000 rpm，5 min）后重悬分瓶。

冻存

对数期细胞离心后，用冻存液重悬（密度≥1×10? cells/mL），程序降温至-80℃后转入液氮。

三、关键注意事项

温度敏感性

最适培养温度为28-30℃，高于32℃易导致细胞代谢异常。

贴壁不牢

部分细胞贴壁较弱，操作时需轻柔吹打，避免细胞流失。

污染防控

收到细胞后立即用75%酒精消毒管壁，检查细胞形态及污染情况。

若细胞密度低或贴壁异常，需用台盼蓝染色检测活力。

四、应用场景与局限性

研究用途：

爬行动物生理学：研究低温适应性及心脏功能调控机制。

比较医学：与哺乳动物心肌细胞对比，探索进化保守通路。

局限性：

温度敏感性限制其在常温培养箱的应用。

仅限科研使用，不可用于临床或食品开发。

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细胞具体特点如下：

环境与营养：需无菌环境、精确的温度（36-37℃）和pH（7.2-7.4），动物细胞常需血清，植物细胞需激素。

生长方式：贴壁细胞需表面附着，悬浮细胞自由漂浮，半贴壁半悬浮兼具两者特性。

传代与密度：贴壁细胞需胰酶消化传代，悬浮细胞直接分瓶；密度达80%-90%时需传代，避免营养枯竭与代谢抑制。

敏感性：对剪切应力、污染、温度变化敏感，需定期更换培养液清除代谢物。

应用与局限：便于活细胞观察与实验控制，但体外环境与体内存在差异，长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。