小白鼠肺成纤维细胞；KMML1 新品

                                                          小白鼠肺成纤维细胞；KMML1
产品信息：

来源与背景

KMML1细胞系（别名MML1）源自昆明小鼠（Mus musculus）肺组织，属成纤维细胞样贴壁细胞，广泛用于肺纤维化机制研究、炎症反应及药物毒性评估。

形态与生长

形态：长梭形，胞质均匀，核呈卵圆形。

生长特性：贴壁生长，汇合度达80%-90%时需传代，推荐传代比例1:2至1:6。

鉴定与质量控制

支原体检测：阴性（微生物法及荧光法验证）。

抗原表达：免疫组化显示波形蛋白（Vimentin）阴性、结蛋白（Desmin）阳性。

培养操作指南

培养条件

基础培养基  DMEM（高糖）

血清添加  10%胎牛血清（FBS）

添加剂  1%双抗（青霉素/链霉素）（可选）

培养环境  37℃、5% CO?、95%空气

传代比例  1:2至1:6（推荐1:3）

冻存条件  90%完全培养基 + 10% DMSO，液氮保存

操作步骤

复苏

37℃水浴快速解冻冻存管，转移至含6 mL完全培养基的离心管，1000 rpm离心5 min。

弃上清，细胞沉淀用完全培养基重悬，接种至T25瓶，培养箱静置2-4小时后观察。

传代

PBS清洗贴壁细胞，加入1 mL 0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化1-2分钟。

显微镜下观察细胞变圆脱落，加入完全培养基终止消化，离心（1000 rpm，5 min）后重悬分瓶。

冻存

对数期细胞离心后，用冻存液重悬（密度≥1×10? cells/mL），程序降温至-80℃后转入液氮。

三、关键注意事项

消化控制

胰酶消化时间需严格监控（1-2分钟），过度消化会导致细胞损伤。

污染防控

收到细胞后需立即检查污染（细菌/真菌/支原体），48小时内反馈问题可申请重发。

操作全程需在生物安全柜中进行。

特殊变体

KMML1/RFP：带红色荧光标记的亚系，需添加嘌呤霉素（4 μg/mL）维持筛选压力。

四、应用场景与局限性

研究用途：

肺纤维化模型：研究TGF-β/Smad信号通路及抗纤维化药物筛选。

毒理学评估：环境污染物（如二氧化硅）对肺成纤维细胞的毒性机制。

局限性：

高传代后可能出现衰老，建议使用10代内细胞。

仅限科研使用，不可用于临床或食品开发。

公司正在出售的产品：

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14-3-3 sigma 英文名称： 14-3-3σ抗体 0.2ml	KLHDC9 英文名称： KLHDC9蛋白抗体 0.2ml
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C4b(Human Complement fragment 4b) ELISA Kit 人补体片断4b	Anti-Rad51 Rad51抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml
Anti-CD20/Biotin 生物素化CD20抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	Rhesus antibody Rh Bcl-2 Bcl-2抗体 规格 0.1ml
Anti-Histone H1 组蛋白H1抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml	Anti-NIK/MAPKKK14 NFkB诱导激酶抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml
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Anti-Phospho-PERK (Thr980)/FITC 荧光素标记0酸化蛋白激酶样内质网激酶抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	Anti-CCL14/HCC-1 嗜酸粒细胞趋化蛋白14抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml
Hepatitis C Virus NS5a 英文名称： 病毒NS5A抗体 0.1ml	小白鼠肺成纤维细胞；KMML1Anti-Phospho-p63 (Ser160/Ser162) /FITC 荧光素标记0酸化P63抑制基因抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
PRELP 英文名称： PRELP蛋白抗体 0.1ml	Anti-KEAP1/FITC 荧光素标记胞质接头蛋白Keap1抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

细胞具体特点如下：

环境与营养：需无菌环境、精确的温度（36-37℃）和pH（7.2-7.4），动物细胞常需血清，植物细胞需激素。

生长方式：贴壁细胞需表面附着，悬浮细胞自由漂浮，半贴壁半悬浮兼具两者特性。

传代与密度：贴壁细胞需胰酶消化传代，悬浮细胞直接分瓶；密度达80%-90%时需传代，避免营养枯竭与代谢抑制。

敏感性：对剪切应力、污染、温度变化敏感，需定期更换培养液清除代谢物。

应用与局限：便于活细胞观察与实验控制，但体外环境与体内存在差异，长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。