豚鼠心肌细胞；GPH4

                                                          豚鼠心肌细胞；GPH4
产品信息：

来源与标记

源自豚鼠心肌组织，通过基因工程改造稳定表达红色荧光蛋白（RFP）或荧光素酶（LUC），便于活细胞示踪与定量检测。

应用领域：

心肌细胞生理功能研究（如钙瞬变、收缩机制）

药物心脏毒性筛选（如阿霉素诱导的心肌损伤）

心肌缺血再灌注模型。

形态与生长

形态：心肌细胞特异性形态，呈短柱状或分支状。

生长特性：部分贴壁（依赖培养瓶表面处理），部分悬浮生长。

倍增时间：约48-72小时（37℃条件下）。

二、培养操作指南

培养体系与条件

基础培养基  DMEM高糖培养基

添加成分  10%胎牛血清（FBS） + 1%青霉素-链霉素 + 0.1 mM β-巯基乙醇

培养环境  温度：37℃ ；

气相：空气95% + CO? 5%  

传代比例  1:2至1:3（贴壁细胞需胰酶消化）

冻存条件  90%完全培养基 + 10% DMSO，液氮储存

操作步骤

复苏

37℃水浴快速解冻冻存管，加入5 mL完全培养基混匀，离心（1000 RPM，5分钟）后重悬接种至明胶包被的T25瓶。

关键点：次日换液去除死细胞，连续观察2-3天。

传代

贴壁细胞：PBS清洗后，加入0.25%胰蛋白酶-EDTA消化1-2分钟（显微镜下观察细胞变圆脱落），加完全培养基终止消化。

悬浮细胞：直接离心收集（1000 RPM，5分钟），重悬后分瓶。

注意事项：消化时间需严格控制（过度消化损伤细胞）。

冻存

汇合度80%时消化，离心后用冻存液重悬，程序降温（-1℃/min）至-80℃后转入液氮。

三、关键注意事项

贴壁不牢问题

运输后细胞脱落属正常现象，可离心收集（1000 RPM，5分钟）后重新接种。

培养瓶需明胶包被（0.1%明胶，37℃孵育1小时）增强贴壁。

荧光标记维护

RFP标记细胞需避光培养，定期检测荧光强度（每10代一次）。

LUC标记细胞需添加嘌呤霉素维持筛选压力。

污染防控

定期检测支原体（推荐PCR法），避免真菌污染（培养基中可添加两性霉素B）。

四、常见问题与解决方案

问题  原因  解决方案

细胞活性低  消化过度或冻存复苏损伤  缩短胰酶作用时间，优化冻存程序

荧光信号减弱  传代次数过多或抗生素失效  每10代用嘌呤霉素巩固筛选

生长缓慢  血清批次差异或培养基pH异常  更换认证FBS，检测培养基pH（7.2-7.4）

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CDK-1(Human Cyclin-dependent kinase 1) ELISA Kit 人周期素依赖性激酶1	Anti-BSA 血清白蛋白抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

细胞具体特点如下：

环境与营养：需无菌环境、精确的温度（36-37℃）和pH（7.2-7.4），动物细胞常需血清，植物细胞需激素。

生长方式：贴壁细胞需表面附着，悬浮细胞自由漂浮，半贴壁半悬浮兼具两者特性。

传代与密度：贴壁细胞需胰酶消化传代，悬浮细胞直接分瓶；密度达80%-90%时需传代，避免营养枯竭与代谢抑制。

敏感性：对剪切应力、污染、温度变化敏感，需定期更换培养液清除代谢物。

应用与局限：便于活细胞观察与实验控制，但体外环境与体内存在差异，长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。