人肺癌细胞(淋巴结转移);NCI-H292-LUC-EGFP

产品信息：

1. 细胞背景与基本特性

母本细胞：NCI-H292 (人肺黏液表皮样癌细胞)

种属来源：人 (Homo sapiens)

组织来源：肺支气管黏液上皮样癌的淋巴结转移灶

年龄/性别：32岁 / 女

生长特性：贴壁生长

细胞形态：上皮细胞样

标记基因：

LUC：荧光素酶，用于生物发光检测（需底物荧光素）。

EGFP：绿色荧光蛋白，用于荧光显微镜观察（Ex/Em = 488/507 nm）。

Puro：嘌呤霉素抗性，用于维持筛选压力（如果构建时包含该抗性）。

应用领域：肺癌机制研究、抗肿瘤药物筛选、裸鼠成瘤实验及活体示踪。

2. 核心参数速览

特征  描述

培养基  RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S

生长状态  贴壁生长 (上皮样)

传代比例  1:2 ～ 1:4

消化时间  1-3 分钟 (胰酶消化)

冻存条件  90% FBS + 10% DMSO 或专用无血清冻存液

3. 详细培养操作指南

NCI-H292-LUC-EGFP 的培养方式与普通 NCI-H292 细胞基本一致，主要区别在于培养基中通常需要添加筛选抗生素以维持双标记的稳定表达。

基础培养条件

温度：37℃

气体环境：95% 空气 + 5% CO

湿度：饱和湿度

推荐培养基配方

基础培养基：RPMI-1640。

血清：10% 胎牛血清 (FBS)。

双抗：1% 青霉素-链霉素 (P/S)。

筛选抗生素：嘌呤霉素 (Puromycin)。

注意：为了维持 LUC 和 EGFP 的稳定表达，建议在培养基中添加嘌呤霉素。通常维持浓度为 0.5 - 1.0 μg/mL（具体浓度需参考构建时的筛选浓度）。

传代操作 (当细胞密度达 80%-90% 时)

弃液：吸去旧的培养上清液。

润洗：加入适量不含钙、镁离子的 PBS 缓冲液，轻轻晃动润洗细胞层 1-2 次，弃去 PBS。

消化：加入 0.25% 胰蛋白酶-EDTA 消化液（T25 瓶加 1 mL），置于 37℃ 培养箱中消化 1-3 分钟。

注意：需在显微镜下观察，待细胞间隙变大、细胞回缩变圆并开始脱落时，立即终止消化。

终止：加入含血清的完全培养基终止消化。

离心与分装：将细胞悬液转移至离心管，1000 rpm 离心 3-5 分钟。弃上清，重悬后按 1:2 至 1:4 的比例分装到新瓶中。

冻存与复苏

冻存液：推荐使用 90% FBS + 10% DMSO，或专用的无血清冻存液。

复苏：37℃ 水浴快速摇晃解冻，立即转移至含完全培养基的离心管中混匀，离心去除上清（去除 DMSO），重悬后接种。

4. 注意事项与常见问题

运输中的脱落（常见问题）：

贴壁细胞在运输途中极易因震动导致脱落。收到细胞后，如果发现瓶底无细胞或细胞极少，请务必离心运输培养基，将管底沉淀的细胞团块重悬接种，不要直接丢弃。

双标记检测：

EGFP：在荧光显微镜下直接观察，细胞应呈现均匀的绿色荧光。

LUC：需加入底物（D-luciferin）后通过化学发光仪或 IVIS 成像系统检测。

筛选压力：

如果在培养过程中去除了嘌呤霉素，可能会导致荧光信号逐渐减弱。建议在实验对照组中保持抗生素筛选。

细胞状态监控：

NCI-H292 细胞在低密度下生长可能较慢，建议保持适当的密度传代。

公司正在出售的产品：

AQP-1(Human Aquaporin 1) ELISA Kit 人水通道蛋白1	TNF- Alpha 小鼠坏死因子-αMulti-class antibodies规格： 48T
Beta-Amyloid 1-42 CT β淀粉样肽 1-42 (C端多肽) 0.1mg	CHORDC1 英文名称： 含半胱酸和组酸丰富域蛋白1抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat Anti-human IgM/HRP 辣根过氧化物酶标记的羊抗人IgM 规格 0.1ml	Antibody Diluent 抗体稀释液 30ml
C9orf150 英文名称： 9号染色体开放阅读框150抗体 0.2ml	Casp-9(Human Caspase-9) ELISA Kit 人胱天蛋白酶9
Anti-WWOX /FITC 荧光素标记包含氧化还原酶的WW域抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	BMP-6(Mouse Bone morphogenetic protein 6) ELISA Kit 小鼠骨形成蛋白6
COMMD10 英文名称： 铜代谢结构域蛋白10抗体 0.2ml	Phospho-Paxillin(Tyr31) 英文名称： 0酸化桩蛋白Paxillin抗体 0.1ml
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phospho-BAD(Ser91) 英文名称： 0酸化相关死亡促进因子抗体 0.1ml	人肺癌细胞(淋巴结转移);NCI-H292-LUC-EGFPAnti-GRM5/FITC 荧光素标记代谢型谷氨酸受体5抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
RASGEF1A 英文名称： 鸟嘌呤核苷酸交换因子rasgef1a抗体 0.2ml	(Mouse mammary carcinoma Marker-CA153) ELISA Kit 小鼠癌标志物-CA153

不同类型细胞的特异性（生物特性差异）

不同类型细胞的特异性（生物特性差异）

形态多样性：细胞形态因功能而异，如成纤维细胞呈梭形或多角形，神经细胞有突起，上皮细胞呈多边形紧密排列；细菌细胞多为球形、杆状或螺旋形。

功能特异性：动物细胞依赖线粒体供能，植物细胞具叶绿体进行光合作用；原核细胞（如细菌）无细胞核，真核细胞（如动植物细胞）有核膜包裹的核；某些细胞如酵母细胞可进行出芽生殖，哺乳动物细胞则通过有丝分裂增殖。

生长特性：贴壁细胞需附着表面生长（如成纤维细胞），悬浮细胞可在培养液中自由生长（如血液细胞）；不同细胞分裂速度各异，如肿瘤细胞增殖较快，正常体细胞分裂较慢。