人脐带间充质干细胞-LUC;MSC-LUC-PURO 新品

                                                          人脐带间充质干细胞-LUC;MSC-LUC-PURO
产品信息：

1. 细胞基本档案

特征维度  详细信息

亲本来源  人脐带间充质干细胞 (hUC-MSC)

标记基因  荧光素酶 (LUC)

筛选抗性  嘌呤霉素 (Puromycin)

生长特性  贴壁生长

细胞形态  梭形、成纤维细胞样

核心特性  多向分化潜能、免疫调节、低免疫原性

生物安全等级  BSL-2

核心特性与应用

活体示踪（LUC）： 这是该细胞最大的优势。通过表达荧光素酶，你可以在小鼠体内通过注射荧光素底物，实时监测干细胞的归巢路径（如向损伤部位迁移）、存活时间及增殖情况。

稳定筛选（Puro）： 利用嘌呤霉素抗性，你可以筛选出高表达 LUC 的细胞克隆，确保细胞群体的均一性和标记的稳定性，防止传代过程中荧光信号丢失。

应用领域：

干细胞治疗研究： 追踪干细胞在心肌梗死、脑卒中、糖尿病等模型中的分布。

抗肿瘤研究： 利用间充质干细胞向肿瘤趋化（TME）的特性，研究其作为抗肿瘤药物载体的靶向性。

组织工程： 研究干细胞在支架材料中的生长和分化。

3. 培养操作手册

基础培养条件

基础培养基：

首选： α-MEM (Minimum Essential Medium Alpha) 或 DMEM/F12。

专用培养基： 推荐使用商家配套的间充质干细胞专用培养基（含生长因子）。

血清： 10% 胎牛血清 (FBS) 或 2% 血小板裂解物 (PLTMax/PLTGold)。

添加剂： 1% 青霉素-链霉素 (双抗)。

特殊添加 (关键)： 为了维持 LUC 基因的稳定表达，建议在培养基中添加 嘌呤霉素 (Puromycin)。

推荐浓度： 通常为 0.5 - 2 μg/mL（具体浓度请参考说明书）。如果不加压，长期传代可能导致荧光素酶表达减弱。

环境： 37℃，5% CO，饱和湿度培养箱。

传代操作 (关键步骤)

MSC-LUC-Puro 是贴壁细胞，需要胰酶消化。

观察： 细胞密度达到 80%-90% 时进行传代（通常为 3-5 天）。

清洗： 弃去旧培养基，用不含钙、镁离子的 PBS 轻柔润洗一次。

消化： 加入适量的 0.25% 胰蛋白酶 (Trypsin-EDTA)，放入培养箱消化 1-2 分钟。

注意： 显微镜下观察，待细胞间隙变大、细胞变圆并开始脱落时即可。间充质干细胞贴壁较牢，可能需要轻敲培养瓶底部辅助脱落。

终止： 加入含血清的完全培养基终止消化。

离心： 1000 rpm 离心 3-5 分钟，弃上清。

重悬： 加入新鲜完全培养基（含 Puromycin），按 1:2 至 1:3 的比例传代。

收货处理

常温运输（T25瓶）：

收到后用 75% 酒精消毒瓶壁，放入培养箱静置 2-4 小时。

重点： 若运输途中细胞脱落，将培养基离心收集，重悬后接种。

干冰运输（冻存管）：

37℃水浴快速复苏，离心重悬后接种。

复苏初期建议在不含 Puromycin 的培养基中培养 24 小时，让细胞恢复状态，随后换用含 Puromycin 的筛选培养基。

4. 特别注意事项

生长速度： 间充质干细胞生长相对较慢，且随着传代次数增加（通常 P5 以后），增殖能力会下降。建议使用低代数（P3-P5）进行实验。

消化敏感： MSC 细胞对胰酶比较敏感，消化时间过长会损伤细胞表面抗原，影响后续实验。请务必在显微镜下监控消化过程。

荧光素酶活性： 在进行体内成像实验前，建议先在体外验证荧光素酶的活性（加入底物检测发光值），确保细胞处于最佳状态。

无菌操作： 该细胞对污染非常敏感，操作时请务必严格遵守无菌操作规范。

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细胞具体特点如下：

环境与营养：需无菌环境、精确的温度（36-37℃）和pH（7.2-7.4），动物细胞常需血清，植物细胞需激素。

生长方式：贴壁细胞需表面附着，悬浮细胞自由漂浮，半贴壁半悬浮兼具两者特性。

传代与密度：贴壁细胞需胰酶消化传代，悬浮细胞直接分瓶；密度达80%-90%时需传代，避免营养枯竭与代谢抑制。

敏感性：对剪切应力、污染、温度变化敏感，需定期更换培养液清除代谢物。

应用与局限：便于活细胞观察与实验控制，但体外环境与体内存在差异，长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。