人鼻咽癌细胞+luc;CNE2-LUC-PURO

产品信息：

1. 细胞基本档案

特征维度  详细信息

亲本来源  人鼻咽癌细胞 (CNE2)

标记基因  荧光素酶 (LUC)

筛选抗性  嘌呤霉素 (Puromycin)

生长特性  贴壁生长

细胞形态  上皮细胞样

组织来源  鼻咽部

培养基  RPMI-1640 + 10% FBS (或 DMEM)

生物安全等级  BSL-2

核心特性与应用

活体示踪： 这是该细胞最大的优势。通过表达荧光素酶，你可以在小鼠体内通过注射荧光素底物，实时、无创地监测肿瘤的原位生长、远处转移以及药物响应。

抗性筛选： Puro (嘌呤霉素抗性) 基因允许你在培养基中添加嘌呤霉素，以维持质粒的稳定表达，防止传代过程中 LUC 基因丢失导致荧光信号减弱。

鼻咽癌机制研究： 研究 EB 病毒感染、信号通路（如 NF-κB）在鼻咽癌中的作用。

药效评价： 利用活体成像技术，动态评估化疗药物或靶向药物对肿瘤负荷的抑制作用。

转移模型： 构建鼻咽癌肺转移或骨转移模型。

3. 培养操作手册

基础培养条件

基础培养基：

首选： RPMI-1640 培养基。

替代： 部分实验室使用 DMEM 高糖培养基。

血清： 10% 胎牛血清 (FBS)。

添加剂： 1% 青霉素-链霉素 (双抗)。

特殊添加 (关键)： 为了维持 LUC 基因的稳定表达，建议在培养基中添加 嘌呤霉素 (Puromycin)。

推荐浓度： 通常为 0.5 - 1.0 μg/mL（具体浓度请参考你所购买细胞的说明书）。如果不加压，长期传代可能导致荧光素酶表达减弱。

环境： 37℃，5% CO，饱和湿度培养箱。

传代操作 (关键步骤)

CNE2-LUC-PURO 是贴壁细胞，需要胰酶消化。

观察： 细胞密度达到 80%-90% 时进行传代。

清洗： 弃去旧培养基，用不含钙、镁离子的 PBS 轻柔润洗一次。

消化： 加入适量的 0.25% 胰蛋白酶 (Trypsin-EDTA)，放入培养箱消化 1-2 分钟。

注意： 显微镜下观察，待细胞间隙变大、细胞变圆并开始脱落时即可。CNE2 细胞贴壁相对较牢，可能需要轻敲培养瓶底部辅助脱落。

终止： 加入含血清的完全培养基终止消化。

吹打： 轻柔吹打使细胞完全脱落并分散均匀。

离心： 1000 rpm 离心 3-5 分钟，弃上清。

重悬： 加入新鲜完全培养基（含 Puromycin），按 1:2 至 1:3 的比例传代。

收货处理

常温运输（T25瓶）：

收到后用 75% 酒精消毒瓶壁，放入培养箱静置 2-4 小时。

重点： CNE2 细胞在运输途中容易因震荡而脱落。若发现瓶底有大量漂浮的细胞团，不要扔！ 将培养基转移到离心管，离心（1000rpm, 5min）收集细胞，弃上清，用 PBS 重悬沉淀后，重新接种到原瓶或新瓶中继续培养。

干冰运输（冻存管）：

37℃水浴快速复苏，离心重悬后接种。

复苏初期建议在不含 Puromycin 的培养基中培养 24 小时，让细胞恢复状态，随后换用含 Puromycin 的筛选培养基。

4. 特别注意事项

荧光素酶活性： 在进行体内成像实验前，建议先在体外验证荧光素酶的活性（加入底物检测发光值），确保细胞处于最佳状态。

支原体检测： 建议定期检测支原体，因为支原体污染可能会影响荧光素酶的表达和细胞的生长状态。

细胞脱落： CNE2 细胞在运输或换液过程中容易脱落，操作时动作要轻柔，避免直接冲击细胞层。

生物安全： 该细胞为人源肿瘤细胞，需在二级生物安全柜内操作。

总结

CNE2-LUC-PURO = CNE2 细胞 + 活体成像能力 (LUC) + 抗性筛选 (Puro)。

它是连接体外细胞实验与体内药效评价的桥梁，尤其适合需要长期动态观察肿瘤生长的实验。

公司正在出售的产品：

不同类型细胞的特异性（生物特性差异）

形态多样性：细胞形态因功能而异，如成纤维细胞呈梭形或多角形，神经细胞有突起，上皮细胞呈多边形紧密排列；细菌细胞多为球形、杆状或螺旋形。

功能特异性：动物细胞依赖线粒体供能，植物细胞具叶绿体进行光合作用；原核细胞（如细菌）无细胞核，真核细胞（如动植物细胞）有核膜包裹的核；某些细胞如酵母细胞可进行出芽生殖，哺乳动物细胞则通过有丝分裂增殖。

生长特性：贴壁细胞需附着表面生长（如成纤维细胞），悬浮细胞可在培养液中自由生长（如血液细胞）；不同细胞分裂速度各异，如肿瘤细胞增殖较快，正常体细胞分裂较慢。