人组织细胞淋巴瘤细胞+luc;U937-LUC-PURO 新品

产品信息：

1. 细胞背景与基本特性

母本细胞：U937 (人组织细胞淋巴瘤细胞)

种属来源：人 (Homo sapiens)

组织来源：组织细胞淋巴瘤（胸腔积液）

供体信息：源自一名 37 岁白人男性的组织细胞淋巴瘤胸水。

生长特性：悬浮生长

细胞形态：单核细胞样（圆形，部分聚团）

标记基因：

LUC：荧光素酶，可用于生物发光成像（需底物荧光素）。

PURO：嘌呤霉素抗性，用于维持筛选压力，确保标记基因的稳定表达。

应用领域：单核/巨噬细胞功能研究、炎症研究、药物筛选、信号转导研究及活体动物成像。

2. 核心参数速览

特征  描述

培养基  RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S

生长状态  悬浮生长 (圆形)

传代比例  1:2 ～ 1:5

冻存条件  90% FBS + 10% DMSO 或专用冻存液

3. 详细培养操作指南

U937-LUC-PURO 细胞的培养方式与普通 U937 细胞基本一致，主要区别在于培养基中需要添加筛选抗生素以维持荧光素酶的表达。

基础培养条件

温度：37℃

气体环境：95% 空气 + 5% CO

湿度：饱和湿度

推荐培养基配方

基础培养基：RPMI-1640。

血清：10% 胎牛血清 (FBS)。

双抗：1% 青霉素-链霉素 (P/S)。

筛选抗生素：嘌呤霉素 (Puromycin)。

注意：为了防止报告基因丢失，建议在培养基中持续添加适量的嘌呤霉素。通常维持浓度为 0.2 - 0.5 μg/mL（具体浓度需参考构建时的筛选浓度）。

传代操作 (当细胞密度达 80%-90% 或细胞密度过高时)

U937 细胞是悬浮细胞，无需胰酶消化。

观察：在显微镜下观察细胞密度和活率。细胞呈圆形，单个或聚集成团。

收集：将培养瓶中的细胞悬液直接转移至离心管中。

离心：1000 rpm (约 200-300g) 离心 5 分钟。

弃上清：小心吸去上清液。

重悬：加入新鲜预热的完全培养基重悬细胞沉淀。

分装：按 1:2 至 1:5 的比例分装到新瓶中。

技巧： 如果细胞聚团严重，可轻轻吹打将其吹散，但不要过度用力以免损伤细胞膜。

冻存与复苏

冻存液：推荐使用 90% FBS + 10% DMSO，或专用的无血清冻存液。

复苏：37℃ 水浴快速摇晃解冻，立即转移至含完全培养基的离心管中混匀，离心去除上清（去除 DMSO），重悬后接种。

4. 注意事项与常见问题

运输中的脱落（常见问题）：

悬浮细胞在运输途中极易因震动而分散。收到细胞后，如果直接观察瓶底无明显细胞沉淀，请务必先颠倒混匀或离心运输培养基，切勿直接丢弃。

细胞聚团：

U937 细胞容易形成大的细胞团块。少量聚团是正常的，但如果团块过大，可能会导致中心细胞缺氧死亡。建议传代时轻轻吹散细胞团。

荧光素酶活性检测：

该细胞表达荧光素酶，可用于活体成像。在进行动物实验前，建议先在体外验证荧光素酶的表达活性（加入荧光素底物后检测发光值）。

筛选压力：

如果在培养过程中去除了嘌呤霉素（Puromycin），部分细胞可能会丢失 LUC 报告基因，导致荧光信号减弱。建议在实验对照组中保持抗生素筛选。

总结：U937-LUC-PURO 是一种悬浮生长的标记淋巴瘤细胞系。它的培养关键在于回收运输后分散的细胞以及添加嘌呤霉素（PURO）以维持荧光素酶表达。该细胞系是肿瘤活体示踪和免疫代谢研究的有力工具。

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不同类型细胞的特异性（生物特性差异）

不同类型细胞的特异性（生物特性差异）

形态多样性：细胞形态因功能而异，如成纤维细胞呈梭形或多角形，神经细胞有突起，上皮细胞呈多边形紧密排列；细菌细胞多为球形、杆状或螺旋形。

功能特异性：动物细胞依赖线粒体供能，植物细胞具叶绿体进行光合作用；原核细胞（如细菌）无细胞核，真核细胞（如动植物细胞）有核膜包裹的核；某些细胞如酵母细胞可进行出芽生殖，哺乳动物细胞则通过有丝分裂增殖。

生长特性：贴壁细胞需附着表面生长（如成纤维细胞），悬浮细胞可在培养液中自由生长（如血液细胞）；不同细胞分裂速度各异，如肿瘤细胞增殖较快，正常体细胞分裂较慢。