SARS 冠状病毒检测试剂盒 新品

SARS 冠状病毒检测试剂盒

试剂简介：

主要检测技术分类

针对SARS-CoV的检测，实验室主要采用两种策略：核酸检测（查病毒本身）和抗体检测（查人体免疫反应）。

1. 核酸检测试剂盒 (RT-PCR / 荧光定量PCR)

这是SARS诊断的“金标准”技术，用于直接检测患者呼吸道标本（如咽拭子、痰液）中是否存在病毒RNA。

检测原理：

靶点：通常针对SARS-CoV的保守基因区域，如N基因（核衣壳蛋白基因）或RdRp基因（RNA依赖的RNA聚合酶基因）。

方法：采用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）或实时荧光定量PCR（qPCR）。

特异性：优秀的试剂盒能将SARS-CoV与普通的人类冠状病毒（如OC43、229E）以及其他呼吸道病毒区分开。

操作流程：

样本采集：采集咽拭子、鼻咽抽取物或痰液。

病毒灭活与核酸提取：使用裂解液处理样本，释放并纯化RNA。

反转录：将RNA逆转录为cDNA。

PCR扩增：将cDNA加入含有引物、探针和酶的反应液中进行扩增。

结果判读：

阳性：扩增曲线呈典型的“S”型，且Ct值小于设定的阈值（如Ct<35）。

阴性：无扩增曲线。

判定标准（科研/诊断标准）：

SARS-CoV RNA阳性通常需要非常严格的确认。例如，至少需要两个不同部位的标本阳性，或者间隔2天的同种标本连续阳性，以排除偶然污染。

2. 抗体检测试剂盒 (ELISA / 间接免疫荧光)

这是辅助诊断的重要手段，用于检测患者血清中是否产生了针对SARS-CoV的特异性抗体。

检测原理：

ELISA法（酶联免疫吸附试验）：利用双抗夹心法或间接法。试剂盒微孔板上包被了SARS-CoV的抗原（如N蛋白或S蛋白），如果血清中有抗体，就会结合上去，再通过酶标记的二抗显色。

IFA法（间接免疫荧光法）：以Vero-E6细胞（SARS-CoV易感细胞）作为抗原基质，加入患者血清，若血清中含有抗体，会在荧光显微镜下看到特异性的荧光信号。

检测指标：

IgM抗体：通常在发病后1周左右出现，提示近期感染或急性期。

IgG抗体：出现较晚，但维持时间长，提示既往感染或恢复期。

确诊标准：

单份血清IgG阳性不一定代表现症感染。

确诊依据：通常需要双份血清（急性期和恢复期），如果恢复期血清抗体滴度比急性期升高4倍或以上，才能确诊为SARS-CoV感染。

 典型试剂盒组成

如果你在科研采购目录中看到“人SARS冠状病毒抗体（SARS-CoV Ab）ELISA检测试剂盒”，其内容通常如下：

组分名称 规格 (96孔板) 作用

微孔酶标板 96孔 (12孔×8条) 预包被SARS-CoV抗原，捕获抗体

标准品/阳性对照 0.5mL 已知浓度的抗体，用于绘制标准曲线

阴性对照 0.5mL 无SARS抗体的血清，作为空白对照

酶结合物 6mL-10mL HRP标记的二抗，用于显色反应

底物A液/B液 各6mL TMB显色液，反应后变蓝

终止液 6mL 硫酸溶液，使反应终止并变黄

浓缩洗涤液 25mL 20×浓缩液，需稀释后用于洗板

 关键注意事项

生物安全等级极高：

SARS-CoV属于高致病性病原微生物。

病毒分离、培养需在BSL-3（生物安全三级）实验室进行。

动物感染实验需在ABSL-3实验室进行。

临床标本的灭活处理和核酸提取应在BSL-2实验室中进行，但必须穿戴更高级别的防护装备。

交叉反应风险：

早期的试剂盒容易与普通冠状病毒（OC43等）发生交叉反应。现代科研试剂盒通常会使用S蛋白（刺突蛋白）的特异性RBD区域作为抗原，以提高特异性，区分SARS-CoV和普通感冒病毒。

假阳性与假阴性：

假阴性：常见于病程早期（病毒载量低）或样本采集不当（如没采到病毒聚集部位）。

假阳性：常见于实验室污染（PCR产物污染）或非特异性抗体结合。

 总结

目前所谓的“SARS检测试剂盒”主要存在于科研领域。

如果你是做病毒检测，主要看RT-PCR试剂盒，关注其引物的特异性和灵敏度（如10拷贝/反应）。

如果你是做血清学调查，主要看ELISA或IFA试剂盒，关注其抗原的纯度和抗体的亲和力。

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